oncotomskСибирский онкологический журналSiberian journal of oncology1814-48612312-3168Tomsk National Research Medical Сепtеr of the Russian Academy of Sciencesoncotomsk-108Research ArticleЛАБОРАТОРНЫЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯLABORATORY AND EXPERIMENTAL STUDIESОСОБЕННОСТИ СУБПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА ЛИМФОЦИТОВ У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ЛЕЧЕНИИ С ВКЛЮЧЕНИЕМ АДОПТИВНОЙ ИММУНОТЕРАПИИCHARACTERISTICS OF LYMPHOCYTE SUBPOPULATION COMPOSITION IN CANCER PATIENTS UNDERGOING COMBINED MODALITY TREATMENT INCLUDING ADAPTIVE IMMUNOTHERAPYАбакушинаЕ. В.AbakushinaE. V.abakushina@mail.ruМаризинаЮ. В.MarizinaYu. V.abakushina@mail.ruНепринаГ. С.NeprinaG. S.abakushina@mail.ruКудрявцевД. В.KudryavtsevD. V.abakushina@mail.ruПасоваИ. А.PasovaI. A.abakushina@mail.ruСеливановаН. В.SelivanovaN. V.abakushina@mail.ruМедицинский радиологический научный центр, ОбнинскРоссияMedical Radiological Research Center, ObninskRussian Federation201516022016114550Copyright © Абакушина Е.В., Маризина Ю.В., Неприна Г.С., Кудрявцев Д.В., Пасова И.А., Селиванова Н.В., 20162016Абакушина Е.В., Маризина Ю.В., Неприна Г.С., Кудрявцев Д.В., Пасова И.А., Селиванова Н.В.Abakushina E.V., Marizina Y.V., Neprina G.S., Kudryavtsev D.V., Pasova I.A., Selivanova N.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.siboncoj.ru/jour/article/view/108

В практической иммунологии клеточный иммунитет принято оценивать по дифференцировочным антигенам или CD-маркерам. Обычно для оценки состава клеточного звена иммунитета используется панель маркеров из 6–8 показателей. В данном исследо вании оценивали не только субпопуляционный состав Т-, В-, NK-, NKT-лимфоцитов, но и маркеры активации (HLA-DR, CD25, CD38, CD69, CD314) методом проточной цитофлуориметрии. Показано, что для 20 пациентов с диссеминированным раком толстой кишки характерно повышение относительного и абсолютного содержания Тreg-лимфоцитов и NK-клеток, а также альфа-цепи рецептора IL-2 (CD25) на лимфоцитах. У 30 больных метастатической меланомой кожи также выявлено повышенное содержание CD25+ клеток и Тreg-лимфоцитов. При сравнительном анализе экспрессии маркеров активации на лимфоцитах было отмечено, что у больных раком толстой кишки повышено содержание активированных CD314+ , CD69+ NK-клеток, а у пациентов с меланомой наблюдалось увеличение количества активированных CD95+ иCD38+ Т-лимфоцитов. Данную панель маркеров можно использовать для мониторинга иммунного статуса онкологических больных на этапах лечения.

Currently, cellular immunity can be estimated using the cluster of differentiation antigens or CD-markers. The panel of CD-markers including 6-8 parameters is usually used for assessment of cellular immunity. In our study we assessed not only subpopulations of T-, B-, NK-, NKT-lymphocytes, but also expression of activation markers (HLA-DR, CD25, CD38, CD69, CD314) using flow cytometry. The increase in the relative and absolute numbers of Treg-lymphocytes and NK-cells as well as the alpha chain of the IL-2 receptor on CD25 lymphocytes was observed in 20 patients with disseminated gastric and colorectal cancer. The percentage of CD25+ -cells and Treg-lymphocytes was also incresaed in 30 patients with skin melanoma. By comparing the expression of lymphocyte activation markers in the two groups of patients, it was shown that patients with gastric and colorectal cancer had the increased percentage of activated CD314+ , CD69+  NK-cells and patients with skin melanoma had the elevated level of activated CD95+  and CD38+ T-lymphocytes. This panel of markers can be used for monitoring immune response to immunotherapy for cancer.

фенотип лимфоцитовмаркеры активациимеланомарак прямой кишкипроточная цитофлуориметрияphenotype of lymphocytesactivation markersskin melanomagastric and colorectal cancerflow cytometryReferencesАбакушина Е.В., Кузьмина Е. Стресс-индуцированные молекулы MICA/B и их роль в развитии онкологических заболеваний // Молекулярная медицина. 2012. № 2. C. 16–20.Abakushina E.V., Kuz’mina E.G. Stress-induced molecules MICA/B and their role in the development of oncological diseases // Molekulyarnaya meditsina. 2012. № 2. P. 16–20. [in Russian]Абакушина Е.В., Кузьмина Е.Г., Коваленко Е.И. Основные свойства и функции NK-клеток человека // Иммунология. 2012. Т. 33, № 4. С. 220–224.Abakushina E.V., Kuz’mina E.G., Kovalenko E.I. The main characteristics of human natural killer cells // Immunologiya. 2012. Vol. 33 (4). P. 220–224. [in Russian]Абакушина Е.В., Маризина Ю.В., Неприна Г.С., Пасова И.А., Бердов Б.А. Изучение фенотипа лимфоцитов после иммунотерапии больных раком желудка и толстого кишечника // Российский биотерапевтический журнал. 2014. T. 13, № 1. С. 57–144.Abakushina E.V., Marizina Yu.V., Neprina G.S., Pasova I.A., Berdov B.A. The study of phenotype lymphocytes after immunotherapy of patients with gastric and colorectal cancer // Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal. 2014. Vol. 13 (1). P. 57. [in Russian]Бережной А.Е., Гнучев Н.В., Георгиев Г.П., Козлов А.М., Ла рин С.С. Молекулярные механизмы взаимодействия опухоли и иммун ной системы // Вопросы онкологии. 2008. Т. 54, № 6. С. 669–683.Berezhnoy A.E., Gnuchev N.V., Georgiev G.P., Kozlov A.M., Larin S.S. Molecular mechanisms of interaction between the tumor and the immune system // Voprosy onkologii. 2008. Vol. 54 (6). P. 669–683. [in Russian]Жулай Г.А., Олейник Е.К. Регуляторные Т-клетки и канцерогенез // Иммунология. 2013. № 1. С. 61–64.Zhulay G.A., Oleynik E.K. Regulatiry T-cells carcinogenesis // Immunologiya. 2013. № 1. P. 61–64. [in Russian]Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В. Злокачественные новообразования в России в 2012 году (заболеваемость и смертность). М., 2014. 250 с.Kaprin A.D., Starinskiy V.V., Petrova G.V. Malignancies in Russia in 2012 (morbidity and mortality). M., 2014. 250 p. [in Russian]Литвинова Л.С., Гуцол А.А., Сохоневич Н.А., Кофанова К.А., Хазиахматова О.Г., Шуплецова В.В., Кайгородова Е.В., Гончаров А.Г. Основные поверхностные маркеры функциональной активности Т-лимфоцитов // Медицинская иммунология. 2014. Т. 16, № 1. С. 7–26.Litvinova L.S., Gutsol A.A., Sokhonevich N.A., Kofanova K.A., Khaziakhmatova O.G., Shupletsova V.V., Kaygorodova E.V., Goncharov A.G. Basic surface markers of functional activity T-lymphocytes // Meditsinskaya immunologiya. 2014. Vol. 16 (1). P. 7–26. [in Russian]Маризина Ю.В., Неприна Г.С., Кудрявцев Д.В., Селиванова Н.В., Абакушина Е.В. Фенотип лимфоцитов у больных меланомой после иммунотерапии // Российский биотерапевтический журнал. 2014. T. 13, № 1. С. 57–144.Marizina Yu.V., Neprina G.S., Kudryavtsev D.V., Selivanova N.V., Abakushina E.V. Phenotype of lymphocytes in patients with melanoma after immunotherapy // Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal. 2014. T. 13 (1). P. 109. [in Russian]Хайдуков С.В., Зурочка А.В., Тотолян А.А., Черешнев В.А. Основные и малые популяции лимфоцитов периферической крови человека и их нормативные значения (методом многоцветного ци тометрического анализа) // Медицинская иммунология. 2009. Т. 11, № 2–3. С. 227–238.Khaydukov S.V., Zurochka A.V., Totolyan A.A., Chereshnev V.A. Major and lymphocyte populations of human peripheral blood lymphocytes and their reference values, as assayed by multi-colour cytometry // Meditsinskaya Immunologiya. 2009. Т. 11 (2–3). P. 227–238. [in Russian]Чередеев А.Н., Горлина Н.К., Козлов И. CD-маркеры в практике клинико-диагностических лабораторий // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. № 6. С. 25–31.Cheredeev A.N., Gorlina N.K., Kozlov I.G. CD-markers in the practice of clinical diagnostic laboratories // Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 1999. № 6. P. 25–31. [in Russian]Clausen J., Vergeiner B., Enk M., Petzer A.L., Gastl G., Gunsilius E. Functional significance of the activation-associated receptor CD25 and CD69 on human NK-cells and NK-like T-cells // Immunobiology. 2003. Vol. 207 (2). P. 85–93.Clausen J., Vergeiner B., Enk M., Petzer A.L., Gastl G., Gunsilius E. Functional significance of the activation-associated receptor CD25 and CD69 on human NK-cells and NK-like T-cells // Immunobiology. 2003. Vol. 207 (2). P. 85–93.Lin R.Y., Astiz M.E., Saxon J.C., Rackow E.C. Altered leukocyte immunophenotypes in septic shock. Studies of HLA-DR, CD11b, CD14, and IL-2R expression // Chest. 1993. Vol. 104 (3). P. 847–853.Lin R.Y., Astiz M.E., Saxon J.C., Rackow E.C. Altered leukocyte immunophenotypes in septic shock. Studies of HLA-DR, CD11b, CD14, and IL-2R expression // Chest. 1993. Vol. 104 (3). P. 847–853.Sabry M., Lowdell M.W. Tumor-primed NK cells: waiting for the green light // Front Immunol. 2013. Vol. 4 (408). P. 1–7. doi: 10.3389/ fimmu.2013.00408.Sabry M., Lowdell M.W. Tumor-primed NK cells: waiting for the green light // Front Immunol. 2013. Vol. 4 (408). P. 1–7. doi: 10.3389/ fimmu.2013.00408.Sandoval-Montes C., Santos-Argumedo L. CD38 is expressed selectively during the activation of a subset of mature T-cells with redused proliferation but improved potential to produce cytokines // Leukocyte Biol. 2005. Vol. 77. P. 513–521.Sandoval-Montes C., Santos-Argumedo L. CD38 is expressed selectively during the activation of a subset of mature T-cells with redused proliferation but improved potential to produce cytokines // Leukocyte Biol. 2005. Vol. 77. P. 513–521.Shinoda K., Tokoyoda K., Hanazawa A., Hayashizaki K., Zehentmeier S., Hosokawa H., Iwamura C., Koseki H., Tumes D.J., Radbruch A., Nakayama T. Type II membrane protein CD69 regulates the formation of resting T-helper memory // Proc. Natl. Acad. Sci. 2012. Vol. 109 (19). P. 7409–7414. doi: 10.1073/pnas.Shinoda K., Tokoyoda K., Hanazawa A., Hayashizaki K., Zehentmeier S., Hosokawa H., Iwamura C., Koseki H., Tumes D.J., Radbruch A., Nakayama T. Type II membrane protein CD69 regulates the formation of resting T-helper memory // Proc. Natl. Acad. Sci. 2012. Vol. 109 (19). P. 7409–7414. doi: 10.1073/pnas.Travers P., Walport M., Shlomchik. M.J. The Immune System in Health and Science // Immuno-Biology 6th ed., Garland Science Publishing. 2005. 27 p.Travers P., Walport M., Shlomchik M.J. The Immune System in Health and Science // Immuno-Biology 6th ed., Garland Science Publishing. 2005. 27 p.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.