oncotomskСибирский онкологический журналSiberian journal of oncology1814-48612312-3168Tomsk National Research Medical Сепtеr of the Russian Academy of Sciences10.21294/1814-4861-2020-19-6-66-72oncotomsk-1641Research ArticleЛАБОРАТОРНЫЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯLABORATORY AND EXPERIMENTAL STUDIESВЗАИМОСВЯЗЬ NKT-КЛЕТОК И АКТИВИРОВАННЫХ CD25+ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ С ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬЮ БЕЗРЕЦИДИВНОЙ И ОБЩЕЙ ВЫЖИВАЕМОСТИ БОЛЬНЫХ ТРИЖДЫ НЕГАТИВНЫМ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫASSOCIATION OF NKT- AND ACTIVATED CD25+ PERIPHERAL BLOOD LYMPHOCYTES WITH DISEASE FREE AND OVERALL SURVIVAL OF TRIPLE NEGATIVE BREAST CANCER PATIENTShttps://orcid.org/0000-0001-9146-5986ЧертковаА. И.ChertkovaA. I.

кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник

SPIN-код: 6083-2870. Author ID (Scopus): 6603256108

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 24

PhD,

Author ID (Scopus): 6603256108

24, Kashirskoe Shosse, 115478, Moscow, Russia 

antcher@gmail.comСлавинаЕ. Г.SlavinaE. G.

доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник

Author ID (Scopus): 6603852193

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 24

PhD, Leading Research Associate

Author ID (Scopus): 6603852193

24, Kashirskoe Shosse, 115478, Moscow, Russia 

https://orcid.org/0000-0001-7631-5699ЗаботинаТ. Н.ZabotinaT. N.

доктор биологических наук, заведующая отделом клинико-лабораторной диагностики, НИИ КО им. акад. РАН и РАМН Н.Н. Трапезникова

SPIN-код: 8628-9705. Author ID (Scopus): 6701659265 

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 24

PhD, DSc, Head of the Department of Clinical and Laboratory Diagnostic

Author ID (Scopus): 6701659265

24, Kashirskoe Shosse, 115478, Moscow, Russia 

tatzabotina@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0058-0987КадагидзеЗ. Г.KadagidzeZ. G.

доктор медицинских наук, профессор, ведущий научный сотрудник

SPIN-код: 5799-8977. Author ID (Scopus): 7006314985

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 24

MD, PhD, Professor, Leading Research Associate

Author ID (Scopus): 7006314985

24, Kashirskoe Shosse, 115478, Moscow, Russia 

ШоуаЭ. К.ShouaE. K.

врач-онколог 

SPIN-код: 5928-1121. Author ID (Scopus): 57201556418

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 24

MD, Oncologist, Laboratory of Clinical Cancer Immunology

Author ID (Scopus): 57201556418

24, Kashirskoe Shosse, 115478, Moscow, Russia 

https://orcid.org/0000-0002-8266-0218ГордееваО. О.GordeevaO. O.

врач-онколог, онкологическое отделение лекарственных методов лечения (химиотерапевтическое) № 3 

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 24

MD, MD, Oncologist

24, Kashirskoe Shosse, 115478, Moscow, Russia 

https://orcid.org/0000-0002-1124-6802КолядинаИ. В.KolyadinaI. V.

доктор медицинских наук, профессор кафедры онкологии и паллиативной медициныРоссия, 125993, г. Москва, ул. Баррикадная, 2/1 

PhD, MD

2/1 Barrikadnaya str., 125993, Moscow, Russia

ЖуковаЛ. Г.ZhukovaL. G.

доктор медицинских наук, профессор РАН, руководитель отделения химиотерапии

Россия, 111123, г. Москва, шоссе Энтузиастов, 86

MD, PhD, Professor

86, Entuziastov Shosse, 1112386, Moscow, Russia

ГаньшинаИ. П.Gan’shinaI. P.

кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник, онкологическое отделение лекарственных методов лечения (химиотерапевтическое) № 3

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 24

MD, PhD, Leading Researcher, Chemotherapy Department

24, Kashirskoe Shosse, 115478, Moscow, Russia 

https://orcid.org/0000-0002-6009-653XМещеряковА. А.MeshcheryakovA. A.

доктор медицинских наук, заведующий отделением, онкологическое отделение лекарственных методов лечения (химиотерапевтическое) № 3  

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 24

MD, PhD, DSc, Head of Chemotherapy Department

24, Kashirskoe Shosse, 115478, Moscow, Russia

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияN.N. Blokhin NMRCORussian FederationФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияRussian Medical Academy of Continuing Professional EducationRussian FederationГБУЗ «Московский клинический научно-практический центр им. А.С. Логинова» Департамента здравоохранения города МосквыРоссияA.S. Loginov MCRC MHDRussian Federation2020281220201966672Copyright © Черткова А.И., Славина Е.Г., Заботина Т.Н., Кадагидзе З.Г., Шоуа Э.К., Гордеева О.О., Колядина И.В., Жукова Л.Г., Ганьшина И.П., Мещеряков А.А., 20202020Черткова А.И., Славина Е.Г., Заботина Т.Н., Кадагидзе З.Г., Шоуа Э.К., Гордеева О.О., Колядина И.В., Жукова Л.Г., Ганьшина И.П., Мещеряков А.А.Chertkova A.I., Slavina E.G., Zabotina T.N., Kadagidze Z.G., Shoua E.K., Gordeeva O.O., Kolyadina I.V., Zhukova L.G., Gan’shina I.P., Meshcheryakov A.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.siboncoj.ru/jour/article/view/1641Введение

Введение. Ранее мы обнаружили, что снижение количества NKT-клеток и активированных CD 25+ лимфоцитов периферической крови до начала неоадъювантной химиотерапии ассоциировалось с повышением вероятности прогрессирования заболевания у больных трижды негативным раком молочной железы II и III стадии.

Цель исследования – изучение взаимосвязи исходного количества NKT- и CD 25+ лимфоцитов периферической крови с безрецидивной и общей выживаемостью больных трижды негативным раком молочной железы, получивших неоадъювантную  химиотерапию цисплатином и паклитакселом и последующее оперативное лечение.

Материал и методы

Материал и методы. В исследование были включены больные трижды негативным раком молочной железы II и III стадии. Период наблюдения составил 36 и 66,9 мес. До начала лечения определяли процент CD 3+CD 16+CD 56+ (NKT)- и CD 25+- лимфоцитов периферической крови методом проточной цитометрии. Статистический анализ данных проводили с использованием пакета статистических программ «Статистика 7». Для определения взаимосвязи иммунологических показателей с безрецидивной и общей выживаемостью больных трижды негативным раком молочной железы использовался метод Каплана–Мейера.

Результаты

Результаты. Сниженный до начала лечения по сравнению с контролем процент NKT-клеток периферической крови ассоциировался с уменьшением трехлетней безрецидивной выживаемости больных [Me – 20,1 (0,533 и 39,7) мес] по сравнению с больными, у которых процент этих клеток был выше, чем в контроле (Me не достигнута). Статистически значимых различий в трехлетней общей выживаемости между данными группами пациенток не наблюдалось. Исходно сниженное по сравнению с контролем  количество CD 25+ лимфоцитов ассоциировалось как с уменьшением безрецидивной, так и общей выживаемости, по сравнению с больными, у которых количество этих клеток до лечения было выше нормы. Различие в продолжительности безрецидивной и общей выживаемости было еще более выражено при сравнении группы пациенток, у которых одновременно было повышено исходное количество и NKT- и CD 25+ клеток, с больными, у которых оба показателя были ниже нормы.

Заключение

Заключение. Исходное (до начала химиотерапии) количество NKT-клеток и  активированных CD 25+ лимфоцитов периферической крови, вероятно, может являться предиктивным фактором у больных трижды негативным раком молочной железы, получавших неоадъювантную химиотерапию цисплатином и паклитакселом. 

Background

Background. We previously found that a decrease in the number of NKT cells and activated CD 25+ peripheral blood lymphocytes (PBLs) before neoadjuvant chemotherapy was associated with an increased likelihood of disease progression in patients with locally advanced triple-negative breast cancer (TN BC).

The purpose of this study was to determine the relationship between the initial number of NKT-and CD 25+ PBLs and relapsefree survival (RFS)/overall survival (OS ) in patients with TN BC who received neoadjuvant chemotherapy with cisplatin and paclitaxel followed by surgery.

Material and Methods

Material and Methods. The study included patients with stage II and III TN BC. The follow-up time was 36 and 66.9 months. Immediately before chemotherapy, the percentage of CD 3+CD 16+CD 56+ (NKT) -, CD 25+- and CD 8+ PBLs was determined by flow cytometry. Statistical analysis of the data was carried out using the Statistics 7 software package. The Kaplan-Meier method was used to determine the relationship between immunological parameters and RFS/ OS .

Results

Results. The decreased level of NKT cells before treatment was associated with a decrease in the 3-year RFS [Me: 20.1 (0.533 and 39.7) months] compared to that observed in patients with higher percentage of these cells than in the control (Me was not achieved). There were no statistically significant differences in the 3-year OS between the groups. The initially reduced number of CD 25+ lymphocytes in comparison with the control was associated with decreased rates of both RFS and OS . The difference in DFS and OS was more significant between the groups of patients who simultaneously had an increased initial number of both NKT and CD 25+ cells and patients in whom both cell populations were below normal levels.

Conclusion

Conclusion. The initial (prior to chemotherapy) number of NKT and activated CD 25+ PBLs can apparently be a predictive factor in TN BC patients, who received neoadjuvant chemotherapy with cisplatin and paclitaxel. 

трижды негативный рак молочной железыNKT-клеткиCD25+ лимфоцитыбезрецидивная выживаемостьобщая выживаемостьнеоадъювантная химиотерапияtriple-negative breast cancerNKT cellsCD25+ lymphocytesrelapse free survivaloverall survivalneoadjuvant chemotherapyReferencesRivenbark A.G., O'Connor S.M., Coleman W.B. Molecular and cellular heterogeneity in breast cancer: challenges for personalized medicine. Am J Pathol. 2013 Oct; 183(4): 1113–1124. doi: 10.1016/j.ajpath.2013.08.002.Rivenbark A.G., O'Connor S.M., Coleman W.B. Molecular and cellular heterogeneity in breast cancer: challenges for personalized medicine. Am J Pathol. 2013 Oct; 183(4): 1113–1124. doi: 10.1016/j.ajpath.2013.08.002.Teng M.W., Galon J., Fridman W.H., Smyth M.J. From mice to humans: developments in cancer immunoediting. J Clin Invest. 2015; 125(9): 3338–46. doi: 10.1172/JCI80004.Teng M.W., Galon J., Fridman W.H., Smyth M.J. From mice to humans: developments in cancer immunoediting. J Clin Invest. 2015; 125(9): 3338–46. doi: 10.1172/JCI80004.Finn O.J. A Believer’s Overview of Cancer Immunosurveillance and Immunotherapy. J Immunol. 2018 Jan 15; 200(2): 385–91. doi: 10.4049/jimmunol.1701302.Finn O.J. A Believer’s Overview of Cancer Immunosurveillance and Immunotherapy. J Immunol. 2018 Jan 15; 200(2): 385–91. doi: 10.4049/jimmunol.1701302.Huang Y., Ma C., Zhang Q., Ye J., Wang F., Zhang Y., Hunborg P., Varvares M.A., Hoft D.F., Hsueh E.C., Peng G. CD4+ and CD8+ T cells have opposing roles in breast cancer progression and outcome. Oncotarget. 2015 Jul 10; 6(19): 17462–78. doi: 10.18632/oncotarget.3958.Huang Y., Ma C., Zhang Q., Ye J., Wang F., Zhang Y., Hunborg P., Varvares M.A., Hoft D.F., Hsueh E.C., Peng G. CD4+ and CD8+ T cells have opposing roles in breast cancer progression and outcome. Oncotarget. 2015 Jul 10; 6(19): 17462–78. doi: 10.18632/oncotarget.3958.Standish L.J., Sweet E.S., Novack J., Wenner C.A., Bridge C., Nelson A., Martzen M., Torkelson C. Breast cancer and the immune system. J Soc Integr Oncol. 2008 Fall; 6(4): 158–68.Standish L.J., Sweet E.S., Novack J., Wenner C.A., Bridge C., Nelson A., Martzen M., Torkelson C. Breast cancer and the immune system. J Soc Integr Oncol. 2008 Fall; 6(4): 158–68.Péguillet I., Milder M., Louis D., Vincent-Salomon A., Dorval T., Piperno-Neumann S., Scholl S.M., Lantz O. High numbers of differentiated effector CD4 T cells are found in patients with cancer and correlate with clinical response after neoadjuvant therapy of breast cancer. Cancer Res. 2014 Apr 15; 74(8): 2204–16. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-13-2269.Péguillet I., Milder M., Louis D., Vincent-Salomon A., Dorval T., Piperno-Neumann S., Scholl S.M., Lantz O. High numbers of differentiated effector CD4 T cells are found in patients with cancer and correlate with clinical response after neoadjuvant therapy of breast cancer. Cancer Res. 2014 Apr 15; 74(8): 2204–16. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-13-2269.Rühle P.F., Fietkau R., Gaipl U.S., Frey B. Development of a Modular Assay for Detailed Immunophenotyping of Peripheral Human Whole Blood Samples by Multicolor Flow Cytometry. Int J Mol Sci. 2016 Aug 11; 17(8): 1316. doi: 10.3390/ijms17081316.Rühle P.F., Fietkau R., Gaipl U.S., Frey B. Development of a Modular Assay for Detailed Immunophenotyping of Peripheral Human Whole Blood Samples by Multicolor Flow Cytometry. Int J Mol Sci. 2016 Aug 11; 17(8): 1316. doi: 10.3390/ijms17081316.Wu J., Waxman D.J. Immunogenic chemotherapy: Dose and schedule dependence and combination with immunotherapy. Cancer Lett. 2018 Apr 10; 419: 210–221. doi: 10.1016/j.canlet.2018.01.050.Wu J., Waxman D.J. Immunogenic chemotherapy: Dose and schedule dependence and combination with immunotherapy. Cancer Lett. 2018 Apr 10; 419: 210–221. doi: 10.1016/j.canlet.2018.01.050.Haikerwal S.J., Hagekyriakou J., MacManus M., Martin O.A., Haynes N.M. Building immunity to cancer with radiation therapy. Cancer Lett. 2015 Nov 28; 368(2): 198–208. doi: 10.1016/j.canlet.2015.01.009.Haikerwal S.J., Hagekyriakou J., MacManus M., Martin O.A., Haynes N.M. Building immunity to cancer with radiation therapy. Cancer Lett. 2015 Nov 28; 368(2): 198–208. doi: 10.1016/j.canlet.2015.01.009.Burugu S., Asleh-Aburaya K., Nielsen T.O. Immune infiltrates in the breast cancer microenvironment: detection, characterization and clinical implication. Breast Cancer. 2017 Jan; 24(1): 3–15. doi: 10.1007/s12282-016-0698-z.Burugu S., Asleh-Aburaya K., Nielsen T.O. Immune infiltrates in the breast cancer microenvironment: detection, characterization and clinical implication. Breast Cancer. 2017 Jan; 24(1): 3–15. doi: 10.1007/s12282-016-0698-z.Черткова А.И., Славина Е.Г., Шоуа Э.К., Жукова Л.Г., Окружнова М.А., Нуртдинова В.А., Борунова А.А., Джгамадзе Н.Т., Кадагидзе З.Г. Основные параметры клеточного иммунитета у больных раком молочной железы с тройным негативным фенотипом. Cвязь с эффективностью химиотерапии. Медицинская иммунология. 2018; 20(5): 667–680.Chertkova A.I., Slavina E.G., Shoua E.K., Zhukova L.G., Okruzhnova M.A., Nurtdinova V.A., Borunova A.A., Dzhgamadze N.T., Kadagidze Z.G. The main parameters of cellular immunity in patients with triple-negative breast cancer: relationship with efficiency of chemotherapy. Medical Immunology. 2018; 20(5): 667–680. (in Russian).Bae E.A., Seo H., Kim I.K., Jeon I., Kang C.Y. Roles of NKT cells in cancer immunotherapy. Arch Pharm Res. 2019 Jul; 42(7): 543–548. doi: 10.1007/s12272-019-01139-8.Bae E.A., Seo H., Kim I.K., Jeon I., Kang C.Y. Roles of NKT cells in cancer immunotherapy. Arch Pharm Res. 2019 Jul; 42(7): 543–548. doi: 10.1007/s12272-019-01139-8.Giaccone G., Punt C.J., Ando Y., Ruijter R., Nishi N., Peters M., von Blomberg B.M., Scheper R.J., van der Vliet H.J., van den Eertwegh A.J., Roelvink M., Beijnen J., Zwierzina H., Pinedo H.M. A phase I study of the natural killer T-cell ligand alpha-galactosylceramide (KRN7000) in patients with solid tumors. Clin Cancer Res. 2002 Dec; 8(12): 3702–9.Giaccone G., Punt C.J., Ando Y., Ruijter R., Nishi N., Peters M., von Blomberg B.M., Scheper R.J., van der Vliet H.J., van den Eertwegh A.J., Roelvink M., Beijnen J., Zwierzina H., Pinedo H.M. A phase I study of the natural killer T-cell ligand alpha-galactosylceramide (KRN7000) in patients with solid tumors. Clin Cancer Res. 2002 Dec; 8(12): 3702–9.Molling J.W., Langius J.A., Langendijk J.A., Leemans C.R., Bontkes H.J., van der Vliet H.J., von Blomberg B.M., Scheper R.J., van den Eertwegh A.J. Low levels of circulating invariant natural killer T cells predict poor clinical outcome in patients with head and neck squamous cell carcinoma. J Clin Oncol. 2007 Mar 1; 25(7): 862–8. doi: 10.1200/JCO.2006.08.5787.Molling J.W., Langius J.A., Langendijk J.A., Leemans C.R., Bontkes H.J., van der Vliet H.J., von Blomberg B.M., Scheper R.J., van den Eertwegh A.J. Low levels of circulating invariant natural killer T cells predict poor clinical outcome in patients with head and neck squamous cell carcinoma. J Clin Oncol. 2007 Mar 1; 25(7): 862–8. doi: 10.1200/JCO.2006.08.5787.Casorati G., de Lalla C., Dellabona P. Invariant natural killer T cells reconstitution and the control of leukemia relapse in pediatric haploidentical hematopoietic stem cell transplantation. Oncoimmunology. 2012 May 1; 1(3): 355–357. doi: 10.4161/onci.18399.Casorati G., de Lalla C., Dellabona P. Invariant natural killer T cells reconstitution and the control of leukemia relapse in pediatric haploidentical hematopoietic stem cell transplantation. Oncoimmunology. 2012 May 1; 1(3): 355–357. doi: 10.4161/onci.18399.Benczik M., Gaffen S.L. The interleukin (IL)-2 family cytokines: survival and proliferation signaling pathways in T lymphocytes. Immunol Invest. 2004 May; 33(2): 109–42. doi: 10.1081/imm-120030732.Benczik M., Gaffen S.L. The interleukin (IL)-2 family cytokines: survival and proliferation signaling pathways in T lymphocytes. Immunol Invest. 2004 May; 33(2): 109–42. doi: 10.1081/imm-120030732.Ellery J.M., Nicholls P.J. Possible mechanism for the alpha subunit of the interleukin-2 receptor (CD25) to influence interleukin-2 receptor signal transduction. Immunol Cell Biol. 2002 Aug; 80(4): 351–7. doi: 10.1046/j.1440-1711.2002.01097.x.Ellery J.M., Nicholls P.J. Possible mechanism for the alpha subunit of the interleukin-2 receptor (CD25) to influence interleukin-2 receptor signal transduction. Immunol Cell Biol. 2002 Aug; 80(4): 351–7. doi: 10.1046/j.1440-1711.2002.01097.x.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.