References

oncotomsk

Сибирский онкологический журнал

Siberian journal of oncology

1814-48612312-3168

Tomsk National Research Medical Сепtеr of the Russian Academy of Sciences

10.21294/1814-4861-2021-20-6-41-54

oncotomsk-1984

Research Article

ЛАБОРАТОРНЫЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

LABORATORY AND EXPERIMENTAL STUDIES

Применение GLAD-ПЦР-анализа для изучения метилирования ДНК в регуляторных областях генов-онкосупрессоров при раке молочной железы

GLAD-PCR assay of DNA methylation sites in regulatory regions of some tumor-suppressor genes in breast cancer

https://orcid.org/0000-0002-5082-8071

Сметанникова

Н. А.

Smetannikova

N. A.

кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник отдела геномных исследований

SPIN-код: 8548-9071. Researcher ID (WOS): A-5864-2014. Author ID (Scopus): 650423744

Россия, 630559, Новосибирская область, р.п. Кольцово

PhD, Senior Researcher, Department of Genomic Research

Researcher ID (WOS): A-5864-2014. Author ID (Scopus): 650423744

630559, Novosibirsk region, Koltsovo, Russia

smetannikova@vector.nsc.ru

Абдурашитов

М. А.

Abdurashitov

M. A.

кандидат биологических наук, старший научный сотрудник

SPIN-код: 3360-3217. Researcher ID (WOS): A-6433-2014. Author ID (Scopus): 6701811260

Россия, 630117, г. Новосибирск, ул. Академика Тимакова, 2/12

PhD, Senior Researcher

Researcher ID (WOS): A-6433-2014. Author ID (Scopus): 6701811260

2/12, Ac. Timakov Street, 630117, Novosibirsk, Russia

Акишев

А. Г.

Akishev

A. G.

старший научный сотрудник

SPIN-код: 5976-0887. Researcher ID (WOS): A-6476-2014. Author ID (Scopus): 6701467349

Россия, 630117, г. Новосибирск, ул. Академика Тимакова, 2/12

PhD

Researcher ID (WOS): A-6476-2014. Author ID (Scopus): 6701467349

2/12, Ac. Timakov Street, 630117, Novosibirsk, Russia

Поздняков

П. И.

Pozdnyakov

P. I.

кандидат химических наук, ведущий научный сотрудник разработки и производства средств диагностики

SPIN-код: 1427-6109. Researcher ID (WOS): A-6604-2014. AuthorID (Scopus): 6603478957

Россия, 630559, Новосибирская область, р.п. Кольцово

PhD, Leading Researcher of Development and Production of Diagnostic Tools

Researcher ID (WOS): A-6604-2014. Author ID (Scopus): 6603478957

630559, Novosibirsk region, Koltsovo, Russia

https://orcid.org/0000-0003-3384-8406

Дубинин

Е. В.

Dubinin

E. V.

кандидат экономических наук, генеральный директор

SPIN-код: 4473-9233. Author ID (Scopus): 57188727732

Россия, 630090, г. Новосибирск, ул. Инженерная, 18

PhD, General Director

Author ID (Scopus): 57188727732

18, Inzhenernaya Street, 630090, Novosibirsk, Russia

https://orcid.org/0000-0002-0119-2740

Карпов

А. Б.

Karpov

A. B.

доктор медицинских наук, профессор, заместитель директора по научной работе; профессор кафедры организации здравоохранения и общественного здоровья

SPINкод: 4393-5855. Researcher ID (WOS): R-7251-2016. Author ID (Scopus): 5594444960

Россия, 636039, г. Северск, Коммунистический пр-т, 87

Россия, 634050, г. Томск, ул. Московский тракт, 2

MD, DSc, Professor, Deputy Director for Research; Professor of the Department of Healthcare Organization and Public Health

Researcher ID (WOS): R-7251-2016. Author ID (Scopus): 5594444960

87, Kommunistitcheskiy Ave., 636039, Seversk, Russia

2, Moskovskiy Trakt, 634050, Tomsk, Russia

Вихлянов

И. В.

Vihlyanov

I. V.

доктор медицинских наук, главный врач

Author ID (Scopus): 57211021828

Россия, 656045, г. Барнаул, ул. Змеиногорский тракт, 110к

MD, DSc, Chief Physician

Author ID (Scopus): 57211021828.

110k, Zmeinogorskiy Trakt, 656045, Barnaul, Russia

Никитин

М. К.

Nikitin

M. K.

заведующий отделением

Россия, 656045, г. Барнаул, ул. Змеиногорский тракт, 110к

MD, Head of Department,

110k, Zmeinogorskiy Trakt, 656045, Barnaul, Russia

Солдатова

С. М.

Soldatova

S. M.

заведующая отделением

Россия, 636000, г. Северск, ул. Мира, 4

Head of Department

4, Mira Street, 636000, Seversk, Russia

https://orcid.org/0000-0002-9896-5403

Нетесова

Н. А.

Netesova

N. A.

доктор биологических наук, заведующая лабораторией отдела геномных исследований

SPIN-код: 2615-3101. Researcher ID (WOS): A-6485-2014

Россия, 630559, Новосибирская область, р.п. Кольцово

DSc, Head of the Laboratory of the Department of Genomic Research

Researcher ID (WOS): A-6485-2014

630559, Novosibirsk region, Koltsovo, Russia

ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»» РоспотребнадзораРоссияState Research center of Virology and Biotechnology «Vector»Russian Federation

ООО «СибЭнзайм»РоссияSibenzyme LtdRussian Federation

ООО «ЭпиДжин»РоссияEpigene LtdRussian Federation

ФГУП «Северский биофизический научный центр» ФМБА России; ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияSeversk Biophysical Research Centre; Siberian State Medical UniversityRussian Federation

КГБУЗ «Алтайский краевой онкологический диспансер»РоссияAltai Regional Oncology CenterRussian Federation

ФГБУ «Сибирский федеральный научно-клинический центр» ФМБА РоссииРоссияSiberian Federal Research And Clinical CentreRussian Federation

ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»» РоспотребнадзораРоссияstate Research center of Virology and Biotechnology «Vector»Russian Federation

2021

11012022

2064154

2022

Сметанникова Н.А., Абдурашитов М.А., Акишев А.Г., Поздняков П.И., Дубинин Е.В., Карпов А.Б., Вихлянов И.В., Никитин М.К., Солдатова С.М., Нетесова Н.А.

Smetannikova N.A., Abdurashitov M.A., Akishev A.G., Pozdnyakov P.I., Dubinin E.V., Karpov A.B., Vihlyanov I.V., Nikitin M.K., Soldatova S.M., Netesova N.A.

Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.

This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.

https://www.siboncoj.ru/jour/article/view/1984

Аберрантное метилирование ДНК на начальных стадиях канцерогенеза приводит к инактивации ряда генов и показано для многих онкологических заболеваний. Ранее с помощью метода glad-ПЦР анализа нами были выявлены аберрантно метилированные сайты R(5mc)gY, которые могут рассматриваться как эпигенетические маркеры при диагностике колоректального рака, рака легкого и рака желудка. При раке молочной железы, по литературным данным, наблюдается метилирование регуляторных участков генов ALX4, BMP2, CCND2, CDH13, CDX1, FOXA1, GALR1, GATA5, GREM1, HIC1, HMX2, HS3ST2, HOXC10, ICAM5, LAMA1, RARB, RASSF1A, RUNX3, RXRG, RYR2, SFRP2, SOX17, TERT и ZNF613. В настоящей работе было проведено определение аберрантно метилированных сайтов RcgY в регуляторных участках данных генов в препаратах ДНК из тканей рака молочной железы. Анализ образцов ДНК из операционного материала опухолей (n=30) и морфологически неизмененных тканей молочной железы (n=22) показал высокую диагностическую эффективность панели маркеров, включающей сайты R(5mc)gY в составе генов CCND2, BMP2, GALR1, SOX17, HMX2 и HS3ST2: суммарные показатели чувствительности и специфичности составляют 90,0 и 100,0 % соответственно.

Hypermethylation of the RcgY sites is shown for many cancer diseases. such aberrant methylation, suppressing the gene activity, occurs at early stages of carcinogenesis. Recently, using glad-pcR assay, we have detected aberrantly methylated RcgY sites, which can be considered to be epigenetic markers of colorectal, lung, and gastric cancers. in breast cancer, methylation of the regulatory regions of ALX4, BMP2, CCND2, CDH13, CDX1, FOXA1, GALR1, GATA5, GREM1, HIC1, HMX2, HS3ST2, HOXC10, ICAM5, LAMA1, RARB, RASSF1A, RUNX3, RXRG, RYR2, SFRP2, SOX17, TERT, and ZNF613 tumor-suppressor genes is reported. in the present work, we determined aberrantly methylated RcgY sites in the regulatory regions of these genes in dNa preparations from breast cancer tissues. the study of dNa samples from 30 tumor and 22 normal mammary tissue samples demonstrates a high diagnostic potential of selected R(5mc)gY sites in regulatory regions of CCND2, BMP2, GALR1, SOX17, HMX2, and HS3ST2 genes with total index of sensitivity and specificity for R(5mc)gY detection in tumor dNa 90.0 % and 100.0 %, respectively.

рак молочной железыгены-онкосупрессорыметилирование ДНКglad-ПЦРанализ

breast cancertumor-suppressor genesdNa methylationglad-pcR assay

Работа проводилась при финансовой поддержке фонда Сколково (грант № Г102/16 от 06 декабря 2016 г.).

The present study was supported by the Skolkovo fund (grunt № G102/16 from 06.12.2016).

References1

GLOBOCAN 2020 Database Provides Latest Global Data on Cancer Burden, Cancer Deaths [Internet]. URL: https://ascopost.com/news/december-2020/globocan-2020-database-provides-latest-global-data-oncancer-burden-cancer-deaths/ (cited 19.04.2021).

Руководство по ранней диагностике рака. Женева: Всемирная организация здравоохранения, 2018. 38 с.

Guide to cancer early diagnosis. Geneva: World Health Organization, 2018. 38 p. (in Russian).

Breast Cancer Survival Rates [Internet]. URL: https://www.webmd.com/breast-cancer/guide/breast-cancer-survival-rates (19.04.2021).

Hesson L.B., Pritchard A.L. Clinical Epigenetics. Springer Singapore, 2019. P. 153–171. doi: 10.1007/978-981-13-8958-0.

Gao L., Emperle M., Guo Y., Grimm S.A., Ren W., Adam S., Uryu H., Zhang Z.M., Chen D., Yin J., Dukatz M., Anteneh H., Jurkowska R.Z., Lu J., Wang Y., Bashtrykov P., Wade P.A., Wang G.G., Jeltsch A., Song J. Comprehensive structure-function characterization of DNMT3B and DNMT3A reveals distinctive de novo DNA methylation mechanisms. Nat Commun. 2020 Jul 3; 11(1): 3355. doi: 10.1038/s41467-020-17109-4.

Кузнецов В.В., Акишев А.Г., Абдурашитов М.А., Дегтярев С.Х. Способ определения нуклеотидной последовательности Pu(5mC)GPy в заданном положении протяженной ДНК. Патент РФ № 2525710. Заявл. 13.06.2013. Опубл. 20.08.2014.

Kuznetsov V.V., Akishev A.G., Abdurashitov M.A., Degtyarev S.Kh. Method of detecting nucleotide sequence Pu(5mC)GPy at predetermined position of long-distance DNA. The patent of Russian Federation No 2525710. 20.08.2014. (in Russian).

Евдокимов А.А., Нетесова Н.А., Сметанникова Н.А., Абдурашитов М.А., Акишев А.Г., Давидович Е.С., Кузнецов В.В., Ермолаев Ю.Д., Карпов А.Б., Сазонов А.Э., Тахауов Р.М., Дегтярев С.Х. Применение метода GLAD-ПЦР анализа для выявления сайтов метилирования в регуляторных областях генов-онкосупрессоров ELMO1 и ESR1 при колоректальном раке. Вопросы онкологии. 2016; 62(1): 117–21.

Evdokimov A.A., Netesova N.A., Smetannikova N.A., Abdurashitov M.A., Akishev A.G., Davidovich E.S., Kuznetsov V.V., Ermolaev Yu.D., Karpov A.B., Sazonov A.E., Takhauov R.M., Degtyarev S.Kh. Application of GLAD-PCR analysis for the methylation sites detection in the regulatory areas of tumor-suppressor genes ELMO1 and ESR1 in colorectal cancer. Problems in Oncology. 2016; 62(1): 117–21. (in Russian).

Evdokimov A.A., Netesova N.A., Smetannikova N.A., Abdurashitov M.A., Akishev A.G. GLAD-PCR Assay of DNA Methylation Markers Associated with Colorectal Cancer. Biol Med (Aligarh) 8: 342. doi: 10.4172/0974-8369.1000342.

Smetannikova N.A., Evdokimov A.A., Netesova N.A., Abdurashitov M.A., Akishev A.G., Dubinin E.V., Pozdnyakov P.I., Vihlyanov I.V., Nikitin M.K., Topolnitsky E.B., Karpov A.B., Kolomiets S.A., Degtyarev S.K. Application of GLAD-PCR Assay for Study on DNA Methylation in Regulatory Regions of Some Tumor-Suppressor Genes in Lung Cancer. Zhongguo Fei Ai Za Zhi. 2019 Sep 20; 22(9): 551–561. doi: 10.3779/j.issn.1009-3419.2019.09.01.

Малышев Б.С., Нетесова Н.А., Сметанникова Н.А., Абдурашитов М.А., Акишев А.Г., Дубинин Е.В., Азанов А.З., Вихлянов И.В., Никитин М.К., Карпов А.Б., Дегтярев С.Х. GLAD-ПЦР-анализ сайтов метилирования ДНК в регуляторных областях генов-онкосупрессоров при раке желудка. Acta Naturae. 2020; 12(3): 124–133. doi: 10.32607/actanaturae.11070.

Malyshev B.S., Netesova N.A., Smetannikova N.A., Abdurashitov M.A., Akishev A.G., Dubinin E.V., Azanov A.Z., Vihlyanov I.V., Nikitin M.K., Karpov A.B., Degtyarev S.Kh. GLAD PCR assay of DNA methylation sites in regulatory regions of some tumor-suppressor genes in breast cancer. Acta Naturae. 2020; 12(3): 124–133. (in Russian). doi: 10.32607/actanaturae.11070.

Дубинин Е.В., Евдокимов А.А., Нетесова Н.А., Сметанникова Н.А., Абдурашитов М.А., Акишев А.Г., Давидович Е.С., Дегтярев С.Х., Кузнецов В.В., Михеев В.Н., Карпов А.Б., Малышев Б.С., Федотов В.В. Способ определения метилирования сайтов PuCGPy регуляторных областей генов-онкомаркеров колоректального рака методом GLAD-ПЦР-анализа и набор олигонуклеотидных праймеров и флуоресцентно-меченых зондов для осуществления указанного способа. Патент РФ № 2630669. Заявл. 16.07.2015. Опубл. 10.09.2017.

Dubinin E.V., Evdokimov A.A., Netesova N.A., Smetannikova N.A., Abdurashitov M.A., Akishev A.G., Davidovich E.S., Degtyarev S.Kh., Kuznetsov V.V., Miheev V.N., Karpov A.B., Malyshev B.S., Fedotov V.V. Method of determining the methylation sites PuCGPy regulatory regions of genes-markers of colorectal cancer by GLAD-PCR-analysis and oligonucleotide primers and fluorescent-labelled probes for realizing said method. The patent of Russian Federation No 2630669. 10.09.2017. (in Russian).

Yang J., Han F., Liu W., Chen H., Hao X., Jiang X., Yin L., Huang Y., Cao J., Zhang H., Liu J. ALX4, an epigenetically down regulated tumor suppressor, inhibits breast cancer progression by interfering Wnt/β-catenin pathway. J Exp Clin Cancer Res. 2017 Nov; 36(1): 170. doi: 10.1186/s13046-017-0643-9.

Du M., Su X.M., Zhang T., Xing Y.J. Aberrant promoter DNA methylation inhibits bone morphogenetic protein 2 expression and contributes to drug resistance in breast cancer. Mol Med Rep. 2014 Aug; 10(2): 1051–5. doi: 10.3892/mmr.2014.2276.

Li Z., Guo X., Wu Y., Li S., Yan J., Peng L., Xiao Z., Wang S., Deng Z., Dai L., Yi W., Xia K., Tang L., Wang J. Methylation profiling of 48 candidate genes in tumor and matched normal tissues from breast cancer patients. Breast Cancer Res Treat. 2015 Feb; 149(3): 767–79. doi: 10.1007/s10549-015-3276-8.

Yang J., Niu H., Huang Y., Yang K. A Systematic Analysis of the Relationship of CDH13 Promoter Methylation and Breast Cancer Risk and Prognosis. PLoS One. 2016 May 6; 11(5): e0149185. doi: 10.1371/journal.pone.0149185.

Liu J., Sun X., Qin S., Wang H., DU N., Li Y., Pang Y., Wang C., Xu C., Ren H. CDH1 promoter methylation correlates with decreased gene expression and poor prognosis in patients with breast cancer. Oncol Lett. 2016 Apr; 11(4): 2635–2643. doi: 10.3892/ol.2016.4274.

Jing X., Liang H., Hao C., Hongxia L., Cui X. Analyses of an epigenetic switch involved in the activation of pioneer factor FOXA1 leading to the prognostic value of estrogen receptor and FOXA1 co-expression in breast cancer. Aging (Albany NY). 2019; 11(18): 7442–7456. doi: 10.18632/aging.102250.

Lindqvist B.M., Wingren S., Motlagh P.B., Nilsson T.K. Whole genome DNA methylation signature of HER2-positive breast cancer. Epigenetics. 2014 Aug; 9(8): 1149–62. doi: 10.4161/epi.29632.

Wang D., Yang P.N., Chen J., Zhou X.Y., Liu Q.J., Li H.J., Li C.L. Promoter hypermethylation may be an important mechanism of the transcriptional inactivation of ARRDC3, GATA5, and ELP3 in invasive ductal breast carcinoma. Mol Cell Biochem. 2014; 396(1–2): 67–77. doi: 10.1007/s11010-014-2143-y.

de Groot J.S., Pan X., Meeldijk J., van der Wall E., van Diest P.J., Moelans C.B. Validation of DNA promoter hypermethylation biomarkers in breast cancer--a short report. Cell Oncol (Dordr). 2014 Aug; 37(4): 297–303. doi: 10.1007/s13402-014-0189-1.

Cheng G., Sun X., Wang J., Xiao G., Wang X., Fan X., Zu L., Hao M., Qu Q., Mao Y., Xue Y., Wang J. HIC1 silencing in triple-negative breast cancer drives progression through misregulation of LCN2. Cancer Res. 2014 Feb; 74(3): 862–72. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-13-2420.

Stirzaker C., Zotenko E., Song J.Z., Qu W., Nair S.S., Locke W.J., Stone A., Armstong N.J., Robinson M.D., Dobrovic A., Avery-Kiejda K.A., Peters K.M., French J.D., Stein S., Korbie D.J., Trau M., Forbes J.F., Scott R.J., Brown M.A., Francis G.D., Clark S.J. Methylome sequencing in triple-negative breast cancer reveals distinct methylation clusters with prognostic value. Nat Commun. 2015 Feb 2; 6: 5899. doi: 10.1038/ncomms6899.

Kassim S.K., Shehata H.H., Abou-Alhussein M.M., Sallam M.M., Amin I.I. Laboratory validation of formal concept analysis of the methylation status of microarray-detected genes in primary breast cancer. Tumour Biol. 2017 Jun; 39(6): 1010428317698390. doi: 10.1177/1010428317698390.

Pathiraja T.N., Nayak S.R., Xi Y., Jiang S., Garee J.P., Edwards D.P, Lee A.V., Chen J., Shea M.J., Santen R.J., Gannon F., Kangaspeska S., Jelinek J., Issa J.P., Richer J.K., Elias A., McIlroy M., Young L.S., Davidson N.E., Schiff R., Li W., Oesterreich S. Epigenetic reprogramming of HOXC10 in endocrine-resistant breast cancer. Sci Transl Med. 2014 Mar 26; 6(229): 229ra41. doi: 10.1126/scitranslmed.3008326.

Симонова О.А., Кузнецова Е.Б., Поддубская Е.В., Кекеева Т.В., Керимов Р.А., Троценко И.Д., Танас А.С., Руденко В.В., Алексеева Е.А., Залетаев Д.В., Стрельников В.В. Гены ламининов, конститутивно и аномально метилированные при раке молочной железы. Молекулярная биология. 2015; 49(4): 667–677.

Simonova O.A., Kuznetsova E.B., Poddubskaya E.V., Kekeeva T.V., Kerimov R.A., Trotsenko I.D., Tanas A.S., Rudenko V.V., Alekseeva E.A., Zaletayev D.V., Strelnikov V.V. DNA methylation in the promoter regions of the laminin family genes in normal and breast carcinoma tissues. Molecular Biology. 2015; 49(4): 598–607. (in Russian).

Yari K., Rahimi Z. Promoter Methylation Status of the Retinoic Acid Receptor-Beta 2 Gene in Breast Cancer Patients: A Case Control Study and Systematic Review. Breast Care (Basel). 2019; 14(2): 117–123. doi: 10.1159/000489874.

Hagrass H.A., Pasha H.F., Shaheen M.A., Abdel Bary E.H., Kassem R. Methylation status and protein expression of RASSF1A in breast cancer patients. Mol Biol Rep. 2014; 41(1): 57–65. doi: 10.1007/s11033-013-2837-3.

Garattini E., Bolis M., Garattini S.K., Fratelli M., Centritto F., Paroni G., Gianni’ M., Zanetti A., Pagani A., Fisher J.N., Zambelli A., Terao M. Retinoids and breast cancer: from basic studies to the clinic and back again. Cancer Treat Rev. 2014 Jul; 40(6): 739–49. doi: 10.1016/j.ctrv.2014.01.001.

Wu H.C., Southey M.C., Hibshoosh H., Santella R.M., Terry M.B. DNA Methylation in Breast Tumor from High-risk Women in the Breast Cancer Family Registry. Anticancer Res. 2017; 37(2): 659–664. doi: 10.21873/anticanres.11361.

Lin I.H., Chen D.T., Chang Y.F., Lee Y.L., Su C.H., Cheng C., Tsai Y.C., Ng S.C., Chen H.T., Lee M.C., Chen H.W., Suen S.H., Chen Y.C., Liu T.T., Chang C.H., Hsu M.T. Hierarchical clustering of breast cancer methylomes revealed differentially methylated and expressed breast cancer genes. PLoS One. 2015 Feb 23; 10(2): e0118453. doi: 10.1371/journal.pone.0118453.

Masood S., El-Gabry E., Zhang C., Wang Z. DNA Methylation of the hTERT Gene in Breast Cancer Revisited: Diagnostic and Clinical Implications. Lab Med. 2016 Nov; 47(4): 293–299. doi: 10.1093/labmed/lmw043.

Silva T.C., Coetzee S.G., Gull N., Yao L., Hazelett D.J., Noushmehr H., Lin D.C., Berman B.P. ELMER v.2: an R/Bioconductor package to reconstruct gene regulatory networks from DNA methylation and transcriptome profiles. Bioinformatics. 2019; 35(11): 1974–1977. doi: 10.1093/bioinformatics/bty902.

HUGO Gene Nomenclature Committee. The resource for approved human gene nomenclature [Internet]. URL: http://www.genenames.org (cited 2021 Apr 19).

Логистическая регрессия и ROC-анализ – математический аппарат [Интернет]. URL: https://loginom.ru/blog/logistic-regressionroc-auc (дата обращения: 19.04.2021). [Logistic regression and ROC analysis – mathematical apparatus [Internet]. URL: https://loginom.ru/blog/logistic-regression-roc-auc (cited 19.04.2021). (in Russian)].

«Золотой стандарт» диагностики и лечения рака молочной железы 2021. Российское общество онкомаммологов. Версия 2.0. 176 с. [Интернет]. URL: http://www.abvpress.ru/project/ www.abvpress.ru/KP_POOM_12.10.20.pdf (дата обращения: 19.04.2021).

«Gold Standard» for breast cancer diagnosis and treatment 2021. Russian society of oncomammologists. Version 2.0. 176 p. [Internet]. URL: http://www.abvpress.ru/project/www.abvpress.ru/KP_POOM_12.10.20.pdf (cited 19.04.2021). (in Russian).

Xia Y.Y., Ding Y.B., Liu X.Q., Chen XM., Cheng S.Q., Li L.B., Ma M.F., He J.L., Wang Y.X. Racial/ethnic disparities in human DNA methylation. Biochim Biophys Acta. 2014; 1846(1): 258–62. doi: 10.1016/j.bbcan.2014.07.001.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.