oncotomskСибирский онкологический журналSiberian journal of oncology1814-48612312-3168Tomsk National Research Medical Сепtеr of the Russian Academy of Sciences10.21294/1814-4861-2024-23-3-86-99oncotomsk-3117Research ArticleЛАБОРАТОРНЫЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯLABORATORY AND EXPERIMENTAL STUDIESИзучение Ридостина Про и Рoly(I:C) в качестве адъювантов, усиливающих иммуногенность противоопухолевой вакциныStudy of Ridostin Pro and Poly(I:C) as adjuvants that enhance the immunogenicity of an antitumor vaccinehttps://orcid.org/0000-0001-9517-8183ПономаревА. В.PonomarevA. V.

Пономарев Александр Васильевич, кандидат биологических наук, младший научный сотрудник

Researcher ID (WOS): H-9954-2018. Author ID (Scopus):  7201616267

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 23 

Aleksandr V. Ponomarev, PhD, Junior Researcher

Researcher ID (WOS): H-9954-2018. Author ID (Scopus): 57201616267 

23, Kashirskoye Shosse, Moscow, 115478, Russia

kl8546@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1182-1010ЦарапаевП. В.TsarapaevP. V.

Царапаев Павел Валерьевич, лаборант-исследователь

Author ID (Scopus): 57810647300

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 23 

Pavel V. Tsarapaev, Laboratory Assistant Researcher

Author ID (Scopus): 57810647300 

23, Kashirskoye Shosse, Moscow, 115478, Russia

https://orcid.org/0000-0002-6688-8423БарышниковаМ. А.BaryshnikovaM. A.

Барышникова Мария Анатольевна, кандидат фармацевтических наук, заведующий лабораторией

Researcher ID (WOS): E-3045-2014. Author ID (Scopus): 56037252000

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 23 

Maria A. Baryshnikova, PhD, Head of Laboratory

Researcher ID (WOS): E-3045-2014. Author ID (Scopus): 56037252000 

23, Kashirskoye Shosse, Moscow, 115478, Russia

https://orcid.org/0000-0003-4755-5313СоколоваЗ. А.SokolovaZ. A.

 Соколова Зинаида Александровна, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник

Researcher ID (WOS): I-7936-2014. Author ID (Scopus): 56684734100

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 23 

Zinaida A. Sokolova, MD, PhD, Senior Researcher

Researcher ID (WOS): I-7936-2014. Author ID (Scopus): 56684734100 

23, Kashirskoye Shosse, Moscow, 115478, Russia

https://orcid.org/0000-0001-7266-7689РудаковаА. А.RudakovaA. A.

Рудакова Анна Андреевна, кандидат биологических наук, младший научный сотрудник

Author ID (Scopus): 58513183000

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 23 

Anna A. Rudakova, PhD, Junior Researcher

Author ID (Scopus): 58513183000 

23, Kashirskoye Shosse, Moscow, 115478, Russia

https://orcid.org/0000-0002-6598-873XМироноваМ. В.MironovaM. V.

Миронова Мария Владимировна, лаборант-исследователь, Научно-исследовательский институт экспериментальной диагностики и терапии опухолей

Researcher ID (WOS): AAG-7073-2021

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 23 

Maria V. Mironova, Laboratory Assistant Researcher, Research Institute of Experimental Diagnostics and Therapy of Tumors

Researcher ID (WOS): AAG-7073-2021 

23, Kashirskoye Shosse, Moscow, 115478, Russia

https://orcid.org/0000-0003-0218-8265ГусевД. В.GusevD. V.

 Гусев Дмитрий Васильевич, кандидат химических наук, заведующий лабораторией, Научно-исследовательский институт экспериментальной диагностики и терапии опухолей

Researcher ID (WOS): H-8977-2018. Author ID (Scopus): 57196605232

Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 23 

Dmitryi V. Gusev, PhD, Head of Laboratory, Research Institute of Experimental Diagnostics and Therapy of Tumors

Researcher ID (WOS): H-8977-2018. Author ID (Scopus): 57196605232 

23, Kashirskoye Shosse, Moscow, 115478, Russia

https://orcid.org/0000-0002-6749-5074ЛевагинаГ. М.LevaginaG. M.

Левагина Галина Михайловна, кандидат биологических наук, заведующая отделом

Researcher ID (WOS): C-7590-2014. Author ID (Scopus): 6506245503  

 Россия, 633010, г. Бердск, ул. Химзаводская, 9 

Galina M. Levagina, PhD, Head of Department

Researcher ID (WOS): C-7590-2014. Author ID (Scopus): 6506245503 

9, Khimzavodskaya St., Berdsk, 633010, Russia

https://orcid.org/0000-0001-5026-1602ДаниленкоЕ. Д.DanilenkoE. D.

Даниленко Елена Дмитриевна, кандидат биологических наук, директор

Researcher ID (WOS): A-7083-2014. Author ID (Scopus): 7004245682

Россия, 633010, г. Бердск, ул. Химзаводская, 9 

Elena D. Danilenko, PhD, Director

Researcher ID (WOS): A-7083-2014. Author ID (Scopus): 7004245682 

9, Khimzavodskaya St., Berdsk, 633010, Russia

https://orcid.org/0000-0002-8462-2178КосоруковВ. С.KosorukovV. S.

Косоруков Вячеслав Станиславович, кандидат биологических наук, директор, Научно-исследовательский институт экспериментальной диагностики и терапии опухолей

Researcher ID (WOS): A-3901-2014. Author ID (Scopus): 6505962801

 Россия, 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 23 

Vyacheslav S. Kosorukov, PhD, Director, Research Institute of Experimental Diagnostics and Therapy of Tumors

Researcher ID (WOS): A-3901-2014. Author ID (Scopus): 6505962801 

23, Kashirskoye Shosse, Moscow, 115478, Russia

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава РоссииРоссияN.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of the RussiaRussian FederationИнститут медицинской биотехнологии ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» РоспотребнадзораРоссияInstitute of Medical Biotechnology of the State Scientific Center of Virology and Biotechnology “Vektor”Russian FederationИнститут медицинской биотехнологии ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» РоспотребнадзораРоссияInstitute of Medical Biotechnology of the State Scientific Center of Virology and Biotechnology “Vektor”Russian Federation2024040720242338699Copyright © Пономарев А.В., Царапаев П.В., Барышникова М.А., Соколова З.А., Рудакова А.А., Миронова М.В., Гусев Д.В., Левагина Г.М., Даниленко Е.Д., Косоруков В.С., 20242024Пономарев А.В., Царапаев П.В., Барышникова М.А., Соколова З.А., Рудакова А.А., Миронова М.В., Гусев Д.В., Левагина Г.М., Даниленко Е.Д., Косоруков В.С.Ponomarev A.V., Tsarapaev P.V., Baryshnikova M.A., Sokolova Z.A., Rudakova A.A., Mironova M.V., Gusev D.V., Levagina G.M., Danilenko E.D., Kosorukov V.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.siboncoj.ru/jour/article/view/3117

Цель исследования – сравнить противоопухолевую эффективность и иммуногенность вакцин с одинаковыми антигенами, но разными адъювантами: Ридостин Про или Poly(I:C); оценить влияние Ридостина Про и Poly(I:C) на цитокиновый профиль сыворотки и иммунофенотип клеток селезенки мышей. Материал и методы. Для оценки противоопухолевой эффективности вакцин с различающимися адъювантами применяли две перевиваемые линии опухолей: меланома В16-F10 и лимфома EG 7-OVA (экспрессирующая овальбумин) для мышей C57BL/6. Против меланомы В16-F10 проводили вакцинацию пептидом TRP2 180–188 с исследуемыми адъювантами в смешанном (профилактический/терапевтический) и терапевтическом режимах. Против лимфомы EG 7 проводили вакцинацию овальбумином с адъювантами в терапевтическом режиме. Иммуногенность вакцин с различающимися адъювантами на мышах без опухолей оценивали методом ELISPO Т. Антигенами в данном случае также служили пептид TRP2 180–188 и белок овальбумин. С помощью проточной цитометрии исследовали цитокиновый профиль сыворотки крови и изменения иммунофенотипа клеток селезенки мышей после введения Ридостина Про или Poly(I:C). Результаты. На модели В16-F10 вакцинация в смешанном режиме защищала мышей от образования опухоли, мыши прожили более 100 дней. Для В16-F10 и EG 7 вакцинация в терапевтическом режиме приводила только к торможению роста опухоли. Ридостин Про и Poly(I:C) показали схожую способность к развитию специфического иммунитета к пептиду TRP2 и овальбумину. Ридостин Про значительнее повышал уровни цитокинов в сыворотке крови мышей по сравнению с Poly(I:C). Оба препарата вызывали схожие по тенденциям изменения иммунофенотипа клеток селезенки, но Ридостин Про сильнее повышал количество CD 69+- Т-клеток, по сравнению с Poly(I:C). Заключение. В результате сравнения двух препаратов в качестве адъювантов для противоопухолевых вакцин можно отметить, что на мышиных моделях отечественный препарат Ридостин Про не уступает по эффективности препарату Poly(I:C). В связи с этим Ридостин Про может рассматриваться как перспективный адъювант для противоопухолевых вакцин и заслуживает дальнейшего изучения.

Aim of the study: to compare the antitumor efficacy and immunogenicity of vaccines with the same antigens but different adjuvants: Ridostin Pro or Poly(I:C); to evaluate the effect of Ridostin Pro and Poly(I:C) on the cytokine profile of serum and the immunophenotype of mouse spleen cells. Material and Methods. To evaluate the antitumor efficacy of vaccines with different adjuvants, two transplantable tumor lines were used: melanoma B16-F10 and EG 7-OVA lymphoma (expressing ovalbumin) for C57BL/6 mice. Against melanoma B16-F10, vaccination with the peptide TRP2 180–188 with the studied adjuvants was performed in a mixed (preventive/therapeutic) and therapeutic regimens. Ovalbumin with adjuvants was vaccinated against EG 7 lymphoma in a therapeutic mode. The immunogenicity of vaccines with different adjuvants in mice without tumors was evaluated by the ELISPOT method. In this case, the peptide TRP2 180–188 and the protein ovalbumin also served as antigens. The cytokine profile of blood serum and changes in the immunophenotype of mouse spleen cells after administration of Ridostin Pro or Poly(I:C) were studied using flow cytometry. Results. In the B16-F10 model, vaccination in a mixed mode protected mice from tumor formation, and the mice lived for more than 100 days. For B16-F10 and EG 7, vaccination in the therapeutic mode led only to inhibition of tumor growth. Ridostin Pro and Poly(I:C) showed a similar ability to develop specific immunity to the peptide TRP2 and ovalbumin. Ridostin Pro increased cytokine levels in the blood serum of mice more strongly than Poly(I:C). Both drugs caused similar changes in the immunophenotype of spleen cells, but Ridostin Pro increased the number of CD 69+ T cells more strongly than Poly(I:C). Conclusion. The comparison of two drugs as adjuvants for antitumor vaccines showed that the domestic drug Ridostin Pro did not inferior in effectiveness to Poly(I:C) on mouse models. In this regard, Ridostin Pro can be considered as a promising adjuvant for antitumor vaccines and deserves further study.

противоопухолевые вакциныадъювантыантигеныРидостинPoly(I:C)пептидыдоклинические исследованияantitumor vaccinesadjuvantsantigensRidostinPoly(I:C)peptidespreclinical studiesРабота выполнена при финансовой поддержке Министерства науки и высшего образования Российской Федерации в рамках научно-исследовательской работы № 075-15-2021-1060 «Создание и развитие биоресурсной коллекции генетически и фенотипически охарактеризованных клеточных линий и первичных опухолей человека».The work had financial support of the Ministry of Science and Higher Education of the Russian Federation as part of the research “Creation and development of a bioresource collection of genetically and phenotypically characterized cell lines and primary human tumors”. Research registration No. 075-15-2021-1060.ReferencesBlass E., Ott P.A. Advances in the development of personalized neoantigen-based therapeutic cancer vaccines. Nat Rev Clin Oncol. 2021; 18(4): 215–29. doi: 10.1038/s41571-020-00460-2.Blass E., Ott P.A. Advances in the development of personalized neoantigen-based therapeutic cancer vaccines. Nat Rev Clin Oncol. 2021; 18(4): 215–29. doi: 10.1038/s41571-020-00460-2.Lybaer L., ThielemansK., FeldmanS.A, van der BurgS.H., Bogaert C., Ott P.A. Neoantigen-directed therapeutics in the clinic: where are we? Trends Cancer. 2023; 9(6): 503–19. doi: 10.1016/j.trecan.2023.02.004.Lybaer L., ThielemansK., FeldmanS.A, van der BurgS.H., Bogaert C., Ott P.A. Neoantigen-directed therapeutics in the clinic: where are we? Trends Cancer. 2023; 9(6): 503–19. doi: 10.1016/j.trecan.2023.02.004.Gouttefangeas C., Rammensee H.G. Personalized cancer vaccines: adjuvants are important, too. Cancer Immunol Immunother. 2018; 67(12): 1911–8. doi: 10.1007/s00262-018-2158-4.Gouttefangeas C., Rammensee H.G. Personalized cancer vaccines: adjuvants are important, too. Cancer Immunol Immunother. 2018; 67(12): 1911–8. doi: 10.1007/s00262-018-2158-4.de Faria I.J., Olmo R.P., Silva E.G., Marques J.T. dsRNA sensing during viral infection: lessons from plants, worms, insects, and mammals. J. Interferon Cytokine Res. 2013; 33(5): 239–53. doi: 10.1089/jir.2013.0026.de Faria I.J., Olmo R.P., Silva E.G., Marques J.T. dsRNA sensing during viral infection: lessons from plants, worms, insects, and mammals. J. Interferon Cytokine Res. 2013; 33(5): 239–53. doi: 10.1089/jir.2013.0026.Hur S. Double-Stranded RNA Sensors and Modulators in Innate Immunity. Annu Rev Immunol. 2019; 37: 349–75. doi: 10.1146/annurevimmunol-042718-041356.Hur S. Double-Stranded RNA Sensors and Modulators in Innate Immunity. Annu Rev Immunol. 2019; 37: 349–75. doi: 10.1146/annurevimmunol-042718-041356.Matsumoto M., Seya T. TLR3: interferon induction by doublestranded RNA including poly(I:C). Adv Drug Deliv Rev. 2008; 60(7): 805–12. doi: 10.1016/j.addr.2007.11.005.Matsumoto M., Seya T. TLR3: interferon induction by doublestranded RNA including poly(I:C). Adv Drug Deliv Rev. 2008; 60(7): 805–12. doi: 10.1016/j.addr.2007.11.005.Ammi R., De Waele J., Willemen Y., Yan Brussel I., Schrijvers D.M., Lion E., Smits E.L.J. Poly(I:C) as cancer vaccine adjuvant: knocking on the door of medical breakthroughs. Pharmacol Ther. 2015; 146: 120–31. doi: 10.1016/j.pharmthera.2014.09.010.Ammi R., De Waele J., Willemen Y., Yan Brussel I., Schrijvers D.M., Lion E., Smits E.L.J. Poly(I:C) as cancer vaccine adjuvant: knocking on the door of medical breakthroughs. Pharmacol Ther. 2015; 146: 120–31. doi: 10.1016/j.pharmthera.2014.09.010.Jasani B., Navabi H., Adams M. Ampligen: a potential toll-like 3 receptor adjuvant for immunotherapy of cancer Vaccine. 2009; 27(25–26): 3401–4. doi: 10.1016/j.vaccine.2009.01.071.Jasani B., Navabi H., Adams M. Ampligen: a potential toll-like 3 receptor adjuvant for immunotherapy of cancer Vaccine. 2009; 27(25–26): 3401–4. doi: 10.1016/j.vaccine.2009.01.071.Sultan H., Fesenkova V.I., Addis D., Fan A.E., Kumai T., Wu J., Salazar A.M., Celis E. Designing therapeutic cancer vaccines by mimicking viral infections. Cancer Immunol Immunother. 2017; 66(2): 203–13. doi: 10.1007/s00262-016-1834-5.Sultan H., Fesenkova V.I., Addis D., Fan A.E., Kumai T., Wu J., Salazar A.M., Celis E. Designing therapeutic cancer vaccines by mimicking viral infections. Cancer Immunol Immunother. 2017; 66(2): 203–13. doi: 10.1007/s00262-016-1834-5.Akazawa T., Ebihara T., Okuno M., Okuda Y., Shingai M., Tsujimura K., Takahashi T., Ikawa M., Okabe M., Inoue N., Okamoto-Tanaka M., Ishizaki H., Miyoshi J., Matsumoto M., Seya T. Antitumor NK activation induced by the Toll-like receptor 3-TICAM-1 (TRIF) pathway in myeloid dendritic cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007; 104(1): 252–7. doi: 10.1073/pnas.0605978104.Akazawa T., Ebihara T., Okuno M., Okuda Y., Shingai M., Tsujimura K., Takahashi T., Ikawa M., Okabe M., Inoue N., Okamoto-Tanaka M., Ishizaki H., Miyoshi J., Matsumoto M., Seya T. Antitumor NK activation induced by the Toll-like receptor 3-TICAM-1 (TRIF) pathway in myeloid dendritic cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007; 104(1): 252–7. doi: 10.1073/pnas.0605978104.Azuma M., Ebihara T., Oshiumi H., Matsumoto M., Seya T. Crosspriming for antitumor CTL induced by soluble Ag + polyI:C depends on the TICAM-1 pathway in mouse CD11c(+)/CD8α(+) dendritic cells. Oncoimmunology. 2012; 1(5): 581–92. doi: 10.4161/onci.19893.Azuma M., Ebihara T., Oshiumi H., Matsumoto M., Seya T. Crosspriming for antitumor CTL induced by soluble Ag + polyI:C depends on the TICAM-1 pathway in mouse CD11c(+)/CD8α(+) dendritic cells. Oncoimmunology. 2012; 1(5): 581–92. doi: 10.4161/onci.19893.Robinson R.A., DeVita V.T., Levy H.B., Baron S., Hubbard S.P., Levine A.S. A phase I–II trial of multiple-dose polyriboinosic-polyribocytidylic acid in patieonts with leukemia or solid tumors. J Natl Cancer Inst. 1976; 57(3): 599–602. doi: 10.1093/jnci/57.3.599.Robinson R.A., DeVita V.T., Levy H.B., Baron S., Hubbard S.P., Levine A.S. A phase I–II trial of multiple-dose polyriboinosic-polyribocytidylic acid in patieonts with leukemia or solid tumors. J Natl Cancer Inst. 1976; 57(3): 599–602. doi: 10.1093/jnci/57.3.599.Levy H.B., Baer G., Baron S., Buckler C.E., Gibbs C.J., Iadarola M.J., London W.T., Rice J. A modified polyriboinosinic-polyribocytidylic acid complex that induces interferon in primates. J Infect Dis. 1975; 132(4): 434–9. doi: 10.1093/infdis/132.4.434.Levy H.B., Baer G., Baron S., Buckler C.E., Gibbs C.J., Iadarola M.J., London W.T., Rice J. A modified polyriboinosinic-polyribocytidylic acid complex that induces interferon in primates. J Infect Dis. 1975; 132(4): 434–9. doi: 10.1093/infdis/132.4.434.Salazar A.M., Levy H.B., Ondra S., Kende M., Scherokman B., Brown D., Mena H., Martin N., Schwab K., Donovan D., Dougherty D., Pulliam M., Ippolito M., Graves M., Brown H., Ommaya A. Long-term treatment of malignant gliomas with intramuscularly administered polyinosinic-polycytidylic acid stabilized with polylysine and carboxymethylcellulose: an open pilot study. Neurosurgery. 1996; 38(6): 1096–103; discussion 1103–4.Salazar A.M., Levy H.B., Ondra S., Kende M., Scherokman B., Brown D., Mena H., Martin N., Schwab K., Donovan D., Dougherty D., Pulliam M., Ippolito M., Graves M., Brown H., Ommaya A. Long-term treatment of malignant gliomas with intramuscularly administered polyinosinic-polycytidylic acid stabilized with polylysine and carboxymethylcellulose: an open pilot study. Neurosurgery. 1996; 38(6): 1096–103; discussion 1103–4.De Waele J., Verhezen T., van der Heijden S., Berneman Z.N., Peeters M., Lardon F., Wouters A., Smits E.L.J.M. A systematic review on poly(I:C) and poly-ICLC in glioblastoma: adjuvants coordinating the unlocking of immunotherapy. J Exp Clin Cancer Res. 2021; 40(1): 213. doi: 10.1186/s13046-021-02017-2.De Waele J., Verhezen T., van der Heijden S., Berneman Z.N., Peeters M., Lardon F., Wouters A., Smits E.L.J.M. A systematic review on poly(I:C) and poly-ICLC in glioblastoma: adjuvants coordinating the unlocking of immunotherapy. J Exp Clin Cancer Res. 2021; 40(1): 213. doi: 10.1186/s13046-021-02017-2.Ott P.A., Hu Z., Keskin D.B., Shukla S.A., Sun J., Bozym D.J., Zhang W., Luoma A., Giobbie-Hurder A., Peter L., Chen C., Olive O., Carter T.A., Li Sh., Lieb D.J., Eisenhaure T., Gjini E., Stevens J., Lane W.J., Javeri I., Nellaiappan K., Salazar A., Daley H., Seaman M., Buchbinder E.I., Yoon C.H., Harden M., Lennon N., Gabriel S., Rodig S.J., Barouch D.H., Aster J.C., Getz G., Wucherpfennig K., Neuberg D., Ritz J., Lander E.S, Fritsch E.F., Hacohen N., Wu C.J. An Immunogenic Personal Neoantigen Vaccine for Melanoma Patients. Nature. 2017; 547(7662): 217–21. doi: 10.1038/nature22991.Ott P.A., Hu Z., Keskin D.B., Shukla S.A., Sun J., Bozym D.J., Zhang W., Luoma A., Giobbie-Hurder A., Peter L., Chen C., Olive O., Carter T.A., Li Sh., Lieb D.J., Eisenhaure T., Gjini E., Stevens J., Lane W.J., Javeri I., Nellaiappan K., Salazar A., Daley H., Seaman M., Buchbinder E.I., Yoon C.H., Harden M., Lennon N., Gabriel S., Rodig S.J., Barouch D.H., Aster J.C., Getz G., Wucherpfennig K., Neuberg D., Ritz J., Lander E.S, Fritsch E.F., Hacohen N., Wu C.J. An Immunogenic Personal Neoantigen Vaccine for Melanoma Patients. Nature. 2017; 547(7662): 217–21. doi: 10.1038/nature22991.Ott P.A., Hu-Lieskovan S., Chmielowski B., Govindan R., Naing A., Bhardwaj N., Margolin K., Awad M.M., Hellmann M.D., Lin J.J., Friedlander T., Bushway M.E., Balogh K.N., Sciuto T.E., Kohler V., Turnbull S.J., Besada R., Curran R.R., Trapp B., Scherer J., Poran A., Harjanto D., Barthelme D., Ting Y.S., Dong J.Z., Ware Y., Huang Y., Huang Z., Wanamaker A., Cleary L.D., Moles M.A., Manson K., Greshock J., Khondker Z.S., Fritsch E., Rooney M.S., DeMario M., Gaynor R.B., Srinivasan L. A Phase Ib Trial of Personalized Neoantigen Therapy Plus Anti-PD-1 in Patients with Advanced Melanoma, Non-small Cell Lung Cancer, or Bladder Cancer. Cell. 2020; 183(2): 347–62. doi: 10.1016/j.cell.2020.08.053.Ott P.A., Hu-Lieskovan S., Chmielowski B., Govindan R., Naing A., Bhardwaj N., Margolin K., Awad M.M., Hellmann M.D., Lin J.J., Friedlander T., Bushway M.E., Balogh K.N., Sciuto T.E., Kohler V., Turnbull S.J., Besada R., Curran R.R., Trapp B., Scherer J., Poran A., Harjanto D., Barthelme D., Ting Y.S., Dong J.Z., Ware Y., Huang Y., Huang Z., Wanamaker A., Cleary L.D., Moles M.A., Manson K., Greshock J., Khondker Z.S., Fritsch E., Rooney M.S., DeMario M., Gaynor R.B., Srinivasan L. A Phase Ib Trial of Personalized Neoantigen Therapy Plus Anti-PD-1 in Patients with Advanced Melanoma, Non-small Cell Lung Cancer, or Bladder Cancer. Cell. 2020; 183(2): 347–62. doi: 10.1016/j.cell.2020.08.053.Барышникова М.А., Пономарев А.В., Рудакова А.А., Соколова З.А., Голубцова Н.В., Царапаев П.В., Левагина Г.М., Даниленко Е.Д., Косоруков В.С. Сравнение Ридостина Про и Poly(I:C) в качестве адъюванта для противоопухолевой неоантигенной вакцины. Российский биотерапевтический журнал. 2022; 21(3): 82–9. doi: 10.17650/1726-9784-2022-21-3-82-89.Baryshnikova M.A., Ponomarev A.V., Rudakova A.A., Sokolova Z.A., Golubtsova N.V., Tsarapaev P.V., Levagina G.M., Danilemko E.D., Kosorukov V.S. Comparison of Ridostin Pro and Poly(I:C) as adjuvant for a cancer neoantigen peptide vaccine. Russian Journal of Biotherapy. 2022; 21(3): 82–9. (in Russian) doi: 10.17650/1726-9784-2022-21-3-82-89.Каплина О.Н., Гамалей С.Г., Иванова О.С., Даниленко Е.Д. Двуспиральные РНК – перспективные адъюванты для повышения иммуногенности вакцин. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2022; 99(6): 661–8. doi: 10.36233/0372-9311-342.Kaplina O.N., Gamaley S.G., Ivanova O.S., Danilenko E.D. Double-stranded RNAs are promising adjuvants for enhancing immunogenicity of vaccines. Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology. 2022; 99(6): 661–8. (in Russian). doi: 10.36233/0372-9311-342.Bloom M.B., Perry-Lalley D., Robbins P.F., Li Y., el-Gamil M., Rosenberg S.A., Yang J.C. Identification of tyrosinase-related protein 2 as a tumor rejection antigen for the B16 melanoma. J Exp Med. 1997; 185(3): 453–9. doi: 10.1084/jem.185.3.453.Bloom M.B., Perry-Lalley D., Robbins P.F., Li Y., el-Gamil M., Rosenberg S.A., Yang J.C. Identification of tyrosinase-related protein 2 as a tumor rejection antigen for the B16 melanoma. J Exp Med. 1997; 185(3): 453–9. doi: 10.1084/jem.185.3.453.Пономарев А.В., Рудакова А.А., Соколова З.А., Барышникова М.А., Косоруков В.С. Влияние Poly(I:C) и меланомы В16-F10 на иммунофенотип клеток селезенки мышей. Российский биотерапевтический журнал 2021; 20(4): 51–8. doi: 10.17650/1726-9784-2021-20-4-51-58.Ponomarev A.V., Rudakova A.A., Sokolova Z.A., Baryshnikova M.A., Kosorukov V.S. Effect of Poly(I:C) and melanoma B16-F10 on the immunophenotype of murine spleen cells. Russian Journal of Biotherapy 2021; 20(4): 51–8. (in Russian). doi: 10.17650/1726-9784-2021-20-4-51-58.Castle J.C., Kreiter S., Diekmann J., Lower M., van de Roemer N., de Graaf J., Selmi A., Diken M., Boegel S., Paret C., Koslowski M., Kuhn A.N., Britten C.M., Huber C., Tureci O., Sahin U. Exploiting the mutanome for tumor vaccination. Cancer Res. 2012; 72(5): 1081–91. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-11-3722.Castle J.C., Kreiter S., Diekmann J., Lower M., van de Roemer N., de Graaf J., Selmi A., Diken M., Boegel S., Paret C., Koslowski M., Kuhn A.N., Britten C.M., Huber C., Tureci O., Sahin U. Exploiting the mutanome for tumor vaccination. Cancer Res. 2012; 72(5): 1081–91. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-11-3722.Lam H., McNeil L.K., Starobinets H., Cohen R.B., Twardowski P., Johnson M.L., Gillison M.L., Stein M.N., Vaishampayan U.N., DeCillis A.P., Foti J.J., Vemulapalli V., Tjon E., Ferber K., DeOliveira D.B., Broom W., Agnihotri P., Jaffee E.M., Wong K.K., Drake C.G., Carroll P.M., Davis T.A., Flechtner J.B. An Empirical Antigen Selection Method Identifies Neoantigens That Either Elicit Broad Antitumor T-cell Responses or Drive Tumor Growth. Cancer Discov. 2021; 11(3): 696–713. doi: 10.1158/2159-8290.CD-20-0377.Lam H., McNeil L.K., Starobinets H., Cohen R.B., Twardowski P., Johnson M.L., Gillison M.L., Stein M.N., Vaishampayan U.N., DeCillis A.P., Foti J.J., Vemulapalli V., Tjon E., Ferber K., DeOliveira D.B., Broom W., Agnihotri P., Jaffee E.M., Wong K.K., Drake C.G., Carroll P.M., Davis T.A., Flechtner J.B. An Empirical Antigen Selection Method Identifies Neoantigens That Either Elicit Broad Antitumor T-cell Responses or Drive Tumor Growth. Cancer Discov. 2021; 11(3): 696–713. doi: 10.1158/2159-8290.CD-20-0377.Heil F., Hemmi H., Hochrein H., Kirschning C., Akira S., Lipford G., Wagner H., Bauer S. Species-specific recognition of single-stranded RNA via toll-like receptor 7 and 8. Science. 2004; 303(5663): 1526–9. doi: 10.1126/science.1093620.Heil F., Hemmi H., Hochrein H., Kirschning C., Akira S., Lipford G., Wagner H., Bauer S. Species-specific recognition of single-stranded RNA via toll-like receptor 7 and 8. Science. 2004; 303(5663): 1526–9. doi: 10.1126/science.1093620.Levine A.S., Levy H.B. Phase I-II trials of poly IC stabilized with poly-L-lysine. Cancer Treat Rep. 1978; 62(11): 1907–12.Levine A.S., Levy H.B. Phase I-II trials of poly IC stabilized with poly-L-lysine. Cancer Treat Rep. 1978; 62(11): 1907–12.Takeda Y., Kataoka K., Yamagishi J., Ogawa S., Seya T., Matsumoto M. A TLR3-Specific Adjuvant Relieves Innate Resistance to PD-L1 Blockade without Cytokine Toxicity in Tumor Vaccine Immunotherapy. Cell Rep. 2017; 19(9): 1874–87. doi: 10.1016/j.celrep.2017.05.015.Takeda Y., Kataoka K., Yamagishi J., Ogawa S., Seya T., Matsumoto M. A TLR3-Specific Adjuvant Relieves Innate Resistance to PD-L1 Blockade without Cytokine Toxicity in Tumor Vaccine Immunotherapy. Cell Rep. 2017; 19(9): 1874–87. doi: 10.1016/j.celrep.2017.05.015.Cossarizza A., Chang H.-D., Radbruch A. et al. Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies (second edition). Eur J Immunol. 2019; 49(10): 1457–973. doi: 10.1002/eji.201970107.Cossarizza A., Chang H.-D., Radbruch A. et al. Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies (second edition). Eur J Immunol. 2019; 49(10): 1457–973. doi: 10.1002/eji.201970107.Bahl K., Hüebner A., Davis R.J., Welsh R.M. Analysis of apoptosis of memory T cells and dendritic cells during the early stages of viral infection or exposure to toll-like receptor agonists. J Virol. 2010; 84(10): 4866–77. doi: 10.1128/JVI.02571-09.Bahl K., Hüebner A., Davis R.J., Welsh R.M. Analysis of apoptosis of memory T cells and dendritic cells during the early stages of viral infection or exposure to toll-like receptor agonists. J Virol. 2010; 84(10): 4866–77. doi: 10.1128/JVI.02571-09.Tough D.F., Borrow P., Sprent J. Induction of bystander T cell proliferation by viruses and type I interferon in vivo. Science. 1996; 272(5270): 1947–50. doi: 10.1126/science.272.5270.1947.Tough D.F., Borrow P., Sprent J. Induction of bystander T cell proliferation by viruses and type I interferon in vivo. Science. 1996; 272(5270): 1947–50. doi: 10.1126/science.272.5270.1947.Bardhan K., Anagnostou T., Boussiotis V.A. The PD1:PD-L1/2 Pathway from Discovery to Clinical Implementation Front Immunol. 2016; 7: 550. doi: 10.3389/fimmu.2016.00550.Bardhan K., Anagnostou T., Boussiotis V.A. The PD1:PD-L1/2 Pathway from Discovery to Clinical Implementation Front Immunol. 2016; 7: 550. doi: 10.3389/fimmu.2016.00550.Kythreotou A., Siddique A., Mauri F.A. Bower M., Pinato D.J. PD-L1. J Clin Pathol. 2018; 71(3): 189–94. doi: 10.1136/jclinpath-2017-204853.Kythreotou A., Siddique A., Mauri F.A. Bower M., Pinato D.J. PD-L1. J Clin Pathol. 2018; 71(3): 189–94. doi: 10.1136/jclinpath-2017-204853.Kinter A.L., Godbout E.J., McNally J.P. Sereti I., Roby G.A., O’Shea M.A., Fauci A.S. The common gamma-chain cytokines IL-2, IL-7, IL-15, and IL-21 induce the expression of programmed death-1 and its ligands. J Immunol. 2008; 181(10): 6738–46. doi: 10.4049/jimmunol.181.10.6738.Kinter A.L., Godbout E.J., McNally J.P. Sereti I., Roby G.A., O’Shea M.A., Fauci A.S. The common gamma-chain cytokines IL-2, IL-7, IL-15, and IL-21 induce the expression of programmed death-1 and its ligands. J Immunol. 2008; 181(10): 6738–46. doi: 10.4049/jimmunol.181.10.6738.Cibrián D., Sánchez-Madrid F. CD69: from activation marker to metabolic gatekeeper. Eur J Immunol. 2017; 47(6): 946–53. doi: 10.1002/eji.201646837.Cibrián D., Sánchez-Madrid F. CD69: from activation marker to metabolic gatekeeper. Eur J Immunol. 2017; 47(6): 946–53. doi: 10.1002/eji.201646837.Testi R., Phillips J.H., Lanier L.L. T cell activation via Leu-23 (CD69). J Immunol. 1989; 143(4): 1123–8.Testi R., Phillips J.H., Lanier L.L. T cell activation via Leu-23 (CD69). J Immunol. 1989; 143(4): 1123–8.Esplugues E., Sancho D., Vega-Ramos J., Martínez C., Syrbe U., Hamann A., Engel P., Sánchez-Madrid F., Lauzurica P. Enhanced antitumor immunity in mice deficient in CD69. J Exp Med. 2003; 197(9): 1093–106. doi: 10.1084/jem.20021337.Esplugues E., Sancho D., Vega-Ramos J., Martínez C., Syrbe U., Hamann A., Engel P., Sánchez-Madrid F., Lauzurica P. Enhanced antitumor immunity in mice deficient in CD69. J Exp Med. 2003; 197(9): 1093–106. doi: 10.1084/jem.20021337.Radulovic K., Manta C., Rossini V., Holzmann K., Kestler H.A., Wegenka U.M., Nakayama T., Niess J.H. CD69 regulates type I IFNinduced tolerogenic signals to mucosal CD4 T cells that attenuate their colitogenic potential. J Immunol. 2012; 188(4): 2001–13. doi: 10.4049/jimmunol.1100765.Radulovic K., Manta C., Rossini V., Holzmann K., Kestler H.A., Wegenka U.M., Nakayama T., Niess J.H. CD69 regulates type I IFNinduced tolerogenic signals to mucosal CD4 T cells that attenuate their colitogenic potential. J Immunol. 2012; 188(4): 2001–13. doi: 10.4049/jimmunol.1100765.Shiow L.R., Rosen D.B., Brdicková N., Xu Y., An J., Lanier L.L., Cyster J.G., Matloubian M. CD69 acts downstream of interferon-alpha/beta to inhibit S1P1 and lymphocyte egress from lymphoid organs. Nature. 2006; 440(7083): 540–4. doi: 10.1038/nature04606.Shiow L.R., Rosen D.B., Brdicková N., Xu Y., An J., Lanier L.L., Cyster J.G., Matloubian M. CD69 acts downstream of interferon-alpha/beta to inhibit S1P1 and lymphocyte egress from lymphoid organs. Nature. 2006; 440(7083): 540–4. doi: 10.1038/nature04606.Walzer T., Bléry M., Chaix J., Fuseri N., Chasson L., Robbins S.H., Jaeger S., André P., Gauthier L., Daniel L., Chemin K., Morel Y., Dalod M., Imbert J., Pierres M., Moretta A., Romagné F., Vivier E. Identification, activation, and selective in vivo ablation of mouse NK cells via NKp46. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104(9): 3384–9. doi: 10.1073/pnas.0609692104.Walzer T., Bléry M., Chaix J., Fuseri N., Chasson L., Robbins S.H., Jaeger S., André P., Gauthier L., Daniel L., Chemin K., Morel Y., Dalod M., Imbert J., Pierres M., Moretta A., Romagné F., Vivier E. Identification, activation, and selective in vivo ablation of mouse NK cells via NKp46. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104(9): 3384–9. doi: 10.1073/pnas.0609692104.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.