oncotomskСибирский онкологический журналSiberian journal of oncology1814-48612312-3168Tomsk National Research Medical Сепtеr of the Russian Academy of Sciences10.21294/1814-4861-2017-16-1-45-52oncotomsk-490Research ArticleЛАБОРАТОРНЫЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯLABORATORY AND EXPERIMENTAL STUDIESАКТИВНОСТЬ НАТУРАЛЬНЫХ КЛЕТОК-КИЛЛЕРОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ У БОЛЬНЫХ КОЛОРЕКТАЛЬНЫМ РАКОМ И РАКОМ ЯИЧНИКОВACTIVITY OF NATURAL KILLER CELLS IN BIOLOGICAL FLUIDS FROM PATIENTS WITH COLORECTAL AND OVARIAN CANCERSЮнусоваН. В.YunusovaN. V.

Юнусова Наталья Валерьевна, доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории биохимии опухолей, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук

SPIN-код: 3513-1888.

MD, DSc, Leading Researcher, Tumor Biochemistry Laboratory, Cancer Research Institute, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences

SPIN-code: 3513-1888

bochkarevanv@oncology.tomsk.ruСтахееваМ. Н.StakheyevaM. N.

доктор медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной онкологии и иммунологии, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук

SPIN-код: 7804-0361.

MD, DSc, Senior Research Scientist, Laboratory of Molecular Oncology and Immunology, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences

SPIN-code: 7804-0361

StakheyevaM@oncology.tomsk.ruАфанасьевС. Г.AfanasyevS. G.

доктор медицинских наук, профессор, главный научный сотрудник торако-абдоминального отделения, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук

SPIN-код: 9206-3037

MD, DSc, Professor, Principal Investigator, Thoracic and Abdominal Department, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences

SPIN-code: 9206-3037

AfanasievSG@oncology.tomsk.ruЦыденоваА. А.TsydenovaA. A.

студентка 6-го курса лечебного факультета

6-nd-year student of Physician Faculty, Siberian State Medical University

nastya.stasy@mail.ruФроловаА. Е.FrolovaA. E.МолчановС. В.MolchanovS. V.

кандидат медицинских наук, научный сотрудник отделения гинекологии с группой профилактики, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук

SPIN-код: 2719-3289

MD, PhD, Researcher, Department of Gynecology with a group of prevention, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences 

SPIN-code: 2719-3289 

SergeyMolchanov1980@gmail.comКоломиецЛ. А.KolomietsL. A.

доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ, заведующая от- делением гинекологии с группой профилактики, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук

SPIN-код: 6316-1146.

MD, DSc, Professor, Head, Department of Gynecology with the Prevention Group, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences

SPIN-code: 6316-1146

kolomietsla@oncology.tomsk.ruЧердынцеваН. В.CherdyntsevaN. V.

доктор биологических наук, член-корреспондент РАН, профессор, заведующая лабораторией молекулярной онкологии и иммунологии, Научно-исследовательский институт онкологии, Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук

SPIN- код: 5344-0990. 

DSc, Associate Member of Russian Academy of Sciences, Professor, Head of the Laboratory of Molecular Oncology and Immunology, Cancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences

SPIN-code: 5344-0990.

nvch@oncology.tomsk.ruНаучно-исследовательский институт онкологии, ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр» Российской академии наук ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава РФРоссияCancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences Siberian State Medical University, RussiaRussian FederationНаучно-исследовательский институт онкологии, ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр» Российской академии наукРоссияCancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of SciencesRussian FederationГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава РФРоссияSiberian State Medical University, RussiaRussian FederationНаучно-исследовательский институт онкологии, ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр» Российской академии наук ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава РФРоссияCancer Research Institute, Tomsk National Research Medical Center, Russian Academy of Sciences Siberian State Medical University, Russia, TomskRussian Federation2017220320171614552Copyright © Юнусова Н.В., Стахеева М.Н., Афанасьев С.Г., Цыденова А.А., Фролова А.Е., Молчанов С.В., Коломиец Л.А., Чердынцева Н.В., 20172017Юнусова Н.В., Стахеева М.Н., Афанасьев С.Г., Цыденова А.А., Фролова А.Е., Молчанов С.В., Коломиец Л.А., Чердынцева Н.В.Yunusova N.V., Stakheyeva M.N., Afanasyev S.G., Tsydenova A.A., Frolova A.E., Molchanov S.V., Kolomiets L.A., Cherdyntseva N.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.siboncoj.ru/jour/article/view/490

Цель исследования – сравнить показатели функциональной активности натуральных клеток-киллеров в зависимости от наличия злокачественного процесса и его распространенности. Материал и методы. В исследование были включены 10 больных раком яичников IIIC стадии, 5 больных с доброкачественными опухолями (ДО) яичника, 15 больных колоректальным раком T2–4N0–2M0 стадии. Контрольную группу составили 5 обследованных здоровых доноров. Для оценки количества и функциональной активности NK-клеток периферической крови и асцитической жидкости (АЖ) выполнена многоцветная проточная цитометрия на цитофлуориметре FACS Canto II. результаты. Наличие злокачественного новообразования сопровождалось статистически значимым снижением в периферической крови относительного количества активированных NK-клеток, секретирующих гранзим В (GB) (CD56+CD107a+GB+PF-), и увеличением доли дегранулированных NK-клеток (CD56+CD107a+GB-PF-) по сравнению с соответствующими показателями у здоровых лиц. При этом отличительной особенностью больных раком яичников были низкие показатели общего количества NK-клеток в периферической крови (p<0,05). Увеличение размера первичной опухоли у больных колоректальным раком приводило к возрастанию в периферической крови доли активирован- ных NK-клеток, содержащих гранулы цитолитических ферментов гранзима В и перфорина (PF). Вместе с тем вовлечение лимфатических узлов в опухолевый процесс при колоректальном раке не оказывало влияния на содержание и активацию NK-клеток. Сравнительный анализ NK-популяции у больных с до- брокачественными и злокачественными новообразованиями яичников выявил значимое преобладание CD56+ пула клеток в асцитической жидкости над содержанием в периферической крови. Отличительной чертой ДО являлся более высокий уровень CD56+CD107a+ активированных и CD56+CD107a+GB-PF- дегранулированных клеток в АЖ, что косвенно указывает на реализацию NK-клетками цитотоксической функции. Для рака яичников было характерно преобладание дегранулированной популяции в перифе- рической крови. Заключение. Наличие и распространенность злокачественного процесса оказывают выраженное влияние на содержание и функциональную активность NK-клеток. Накопление свободной жидкости в брюшной полости как у больных с ДО, так и со злокачественными опухолями яичников сопро- вождается существенным снижением уровня NK-клеток в периферической крови и его увеличением в АЖ. Выявленные различия функциональной активности NK-клеток в свободной жидкости в брюшной полости и периферической крови у больных раком яичников и ДО требуют дальнейшего изучения с исследованием рецепторного статуса лимфоцитов и, возможно, цитокин-продуцирующей функции NK-клеток.>< 0,05). Увеличение размера первичной опухоли у больных колоректальным раком приводило к возрастанию в периферической крови доли активирован- ных NK-клеток, содержащих гранулы цитолитических ферментов гранзима В и перфорина (PF). Вместе с тем вовлечение лимфатических узлов в опухолевый процесс при колоректальном раке не оказывало влияния на содержание и активацию NK-клеток. Сравнительный анализ NK-популяции у больных с доброкачественными и злокачественными новообразованиями яичников выявил значимое преобладание CD56+ пула клеток в асцитической жидкости над содержанием в периферической крови. Отличительной чертой ДО являлся более высокий уровень CD56+CD107a+ активированных и CD56+CD107a+GB-PF- дегранулированных клеток в АЖ, что косвенно указывает на реализацию NK-клетками цитотоксической функции. Для рака яичников было характерно преобладание дегранулированной популяции в периферической крови. Заключение. Наличие и распространенность злокачественного процесса оказывают выраженное влияние на содержание и функциональную активность NK-клеток. Накопление свободной жидкости в брюшной полости как у больных с ДО, так и со злокачественными опухолями яичников сопровождается существенным снижением уровня NK-клеток в периферической крови и его увеличением в АЖ. Выявленные различия функциональной активности NK-клеток в свободной жидкости в брюшной полости и периферической крови у больных раком яичников и ДО требуют дальнейшего изучения с исследованием рецепторного статуса лимфоцитов и, возможно, цитокин-продуцирующей функции NK-клеток.

 

Objective

Objective. To compare the functional activity of natural killer cells in peripheral blood and ascites from patients with different stages of colorectal and ovarian cancers and benign ovarian tumors. Material and methods. The study included 10 patients with stage IIIC ovarian cancer (FIGO, 2009), 5 patients with benign ovarian tumors (BOTs), and 15 patients with colorectal cancer (T2–4N0–2M0 ). The control group consisted of 5 healthy donors. To evaluate the number and functional activity of NK-cells in peripheral blood and ascites, the FACS Canto II Flow Cytometer was used. Results. In peripheral blood of patients with ovarian and colorectal cancers, the relative number of activated NK-cells capable of secreting granzyme B (GB) (CD56 + CD107a + GB + PF-) was significantly lower and the proportion of degranulated NK-cells (CD56 + CD107a + GB- PF-) was higher than those of healthy donors. Low total NK-cell counts in peripheral blood were a distinctive feature of ovarian cancer patients (p<0.05). The proportion of activated peripheral blood NK-cells, containing granules of cytolytic enzymes GB and perforin (PF) increased with tumor growth. However, lymph node metastasis in patients with colorectal cancer did not affect the level and activation of NK-cells. The comparative analysis of NK-populations in patients with benign and malignant ovarian tumors revealed that the level of CD56 + cells was significantly higher in tumor ascites compared to peripheral blood. In patients with BTs, the levels of CD56 + CD107a + and activated CD56 + CD107a + GB-PF-degranulated cells was higher in ascites than in blood. In patients with ovarian cancer, the level of degranulated cells was higher in peripheral blood than in malignant ascites. Conclusion. The tumor cells and tumor microenvironment were found to affect the number and the functional activity of NK-cells. The accumulation of free fluid within the peritoneal cavity in patients with both benign and malignant ovarian tumors resulted in significantly decreased levels of NK-cells in peripheral blood and increased levels in ascites. The differences in the functional activity of NK-cells in ascites and peripheral blood of patients with ovarian cancer require further investigation of the lymphocyte receptor status and possibly cytokine-producing function of NK-cells. Key words: ovarian cancer, colorectal cancer, natural killer cells, functional activity of peripheral blood, ascites.>< 0.05). The proportion of activated peripheral blood NK-cells, containing granules of cytolytic enzymes GB and perforin (PF) increased with tumor growth. However, lymph node metastasis in patients with colorectal cancer did not affect the level and activation of NK-cells. The comparative analysis of NK-populations in patients with benign and malignant ovarian tumors revealed that the level of CD56 + cells was significantly higher in tumor ascites compared to peripheral blood. In patients with BTs, the levels of CD56 + CD107a + and activated CD56 + CD107a + GB-PF-degranulated cells was higher in ascites than in blood. In patients with ovarian cancer, the level of degranulated cells was higher in peripheral blood than in malignant ascites. Conclusion. The tumor cells and tumor microenvironment were found to affect the number and the functional activity of NK-cells. The accumulation of free fluid within the peritoneal cavity in patients with both benign and malignant ovarian tumors resulted in significantly decreased levels of NK-cells in peripheral blood and increased levels in ascites. The differences in the functional activity of NK-cells in ascites and peripheral blood of patients with ovarian cancer require further investigation of the lymphocyte receptor status and possibly cytokine-producing function of NK-cells.

 

 

рак яичниковколоректальный ракнатуральные киллерыфункциональная активностьпериферическая кровьасцитovarian cancercolorectal cancernatural killer cellsfunctional activity of peripheral bloodascitesReferencesBaginska J., Viry E., Paggetti J., Medves S., Berchem G., Moussay E., Janji B. The Critical Role of the Tumor Microenvironment in Shaping Natural Killer Cell-Mediated Anti-Tumor Immunity. Front Immunol. 2013 Dec 25; 4: 490. doi: 10.3389/fimmu.2013.00490.Baginska J., Viry E., Paggetti J., Medves S., Berchem G., Moussay E., Janji B. The Critical Role of the Tumor Microenvironment in Shaping Natural Killer Cell-Mediated Anti-Tumor Immunity. Front Immunol. 2013 Dec 25; 4: 490. doi: 10.3389/fimmu.2013.00490.Larsen S.K., Gao Y., and Basse P.H. NK Cells in the Tumor Microenvironment. Crit Rev Oncog. 2014; 19 (1–2): 91–105.Larsen S.K., Gao Y., and Basse P.H. NK Cells in the Tumor Microenvironment. Crit Rev Oncog. 2014; 19 (1–2): 91–105.Apetoh L., Obeid M., Tesniere A., Ghiringhelli F., Fimia G.M., Piacentini M., Kroemer G., Zitvogel L. Immunogenic chemotherapy: discovery of a critical protein through proteomic analyses of tumor cells Cancer Genomics Proteomics. 2007 Mar-Apr; 4 (2): 65–70.Apetoh L., Obeid M., Tesniere A., Ghiringhelli F., Fimia G.M., Piacentini M., Kroemer G., Zitvogel L. Immunogenic chemotherapy: discovery of a critical protein through proteomic analyses of tumor cells Cancer Genomics Proteomics. 2007 Mar-Apr; 4 (2): 65–70.Hannani D., Sistigu A., Kepp O., Galuzzi L., Kroemer G., Zitvogel L. Prerequisites for the antitumor vaccine-like effect of chemotherapy and radiotherapy. Cancer J. 2011; 17 (5): 351–8. doi: 10.1097/ PPO.0b013e3182325d4d.Hannani D., Sistigu A., Kepp O., Galuzzi L., Kroemer G., Zitvogel L. Prerequisites for the antitumor vaccine-like effect of chemotherapy and radiotherapy. Cancer J. 2011; 17 (5): 351–8. doi: 10.1097/ PPO.0b013e3182325d4d.Стахеева М.Н., Чойнзонов Е.Л., Чижевская С.Ю., Бычков В.А. Взаимосвязь эффективности противоопухолевого лечения с состоянием иммунной системы у больных раком гортани и гортаноглотки. Медицинская иммунология. 2013; 15 (6): 553–62.Staheeva M.N., Chojnzonov E.L., Chizhevskaja S.Yu., Bychkov V.A. Interrelationship between efficiency of cancer treatment and state of immune system in patients with laryngeal and hypopharyngeal cancer. Medical immunology. 2013; 15 (6): 553–62. [in Russian]Cohnen A., Chiang S.C., Stojanovic A., Schmidt H., Claus M., Saftig P., Janßen O., Cerwenka A., Bryceson Y.T., Watzl C. Surface CD107a/LAMP-1 protects natural killer cells from degranulation-associated damage. Blood. 2013 Aug 22; 122 (8): 1411–8. doi: 10.1182/blood-2012-07-441832.Cohnen A., Chiang S.C., Stojanovic A., Schmidt H., Claus M., Saftig P., Janßen O., Cerwenka A., Bryceson Y.T., Watzl C. Surface CD107a/ LAMP-1 protects natural killer cells from degranulation-associated damage. Blood. 2013 Aug 22; 122 (8): 1411–8. doi: 10.1182/blood-2012 -07-441832.Krzewski K., Gil-Krzewska A., Nguyen V., Peruzzi G., Coligan J.E. LAMP1/CD107a is required for efficient perforin delivery to lytic granules and NK-cell cytotoxicity. Blood. 2013 Jun 6; 121(23): 4672 83. doi: 10.1182/blood-2012-08-453738.Krzewski K., Gil-Krzewska A., Nguyen V., Peruzzi G., Coligan J.E. LAMP1/CD107a is required for efficient perforin delivery to lytic granules and NK-cell cytotoxicity. Blood. 2013 Jun 6; 121 (23): 4672 83. doi: 10.1182/blood-2012-08-453738.Bamias A., Tsiatas M.L., Kafantari E., Liakou C., Rodolakis A., Voulgaris Z., Vlahos G., Papageorgiou T., Tsitsilonis O., Bamia C., Papatheodoridis G., Politi E., Archimandritis A., Antsaklis A., Dimopoulos M.A. Significant differences of lymphocytes isolated from ascites of patients with ovarian cancer compared to blood and tumor lymphocytes. Association of CD3+CD56+ cells with platinum resistance. Gynecol Oncol. 2007 Jul; 106 (1): 75–81. doi: 10.1016/j.ygyno.2007.02.029.Bamias A., Tsiatas M.L., Kafantari E., Liakou C., Rodolakis A., Voulgaris Z., Vlahos G., Papageorgiou T., Tsitsilonis O., Bamia C., Papatheodoridis G., Politi E., Archimandritis A., Antsaklis A., Dimopoulos M.A. Significant differences of lymphocytes isolated from ascites of patients with ovarian cancer compared to blood and tumor lymphocytes. Association of CD3+CD56+ cells with platinum resistance. Gynecol Oncol. 2007 Jul; 106 (1): 75–81. doi: 10.1016/j.ygyno.2007.02.029.Lukesova S., Vroblova V., Tosner J., Kopecky J., Sedlakova I., Čermáková E., Vokurkova D., Kopecky O. Comparative study of various subpopulations of cytotoxic cells in blood and ascites from patients with ovarian carcinoma. Contemp. Oncol. (Pozn). 2015; 19 (4): 290–9. doi: 10.5114/wo.2015.54388.Lukesova S., Vroblova V., Tosner J., Kopecky J., Sedlakova I., Čermáková E., Vokurkova D., Kopecky O. Comparative study of various subpopulations of cytotoxic cells in blood and ascites from patients with ovarian carcinoma. Contemp. Oncol. (Pozn). 2015; 19 (4): 290–9. doi: 10.5114/wo.2015.54388.Bai D., Yang G., Yuan H., Li Y., Wang K., Shao H. Perioperative cimetidine application modulates natural killer cells in patients with colorectal cancer: a randomized clinical study. J. Tongji Med. Univ. 1999; 19 (4): 300–303.Bai D., Yang G., Yuan H., Li Y., Wang K., Shao H. Perioperative cimetidine application modulates natural killer cells in patients with colorectal cancer: a randomized clinical study. J. Tongji Med. Univ. 1999; 19 (4): 300–303.Peng Y.P., Zhu Y., Zhang J.J., Xu Z.K., Qian Z.Y., Dai C.C., Jiang K.R., Wu J.L., Gao W.T., Li Q., Du Q., Miao Y. Comprehensive analysis of the percentage of surface receptors and cytotoxic granules positive natural killer cells in patient with pancreatic cancer, gastric cancer, and colorectal cancer. J Transl Med. 2013 Oct 20; 11: 262. doi: 10.1186/1479-5876-11-262.Peng Y.P., Zhu Y., Zhang J.J., Xu Z.K., Qian Z.Y., Dai C.C., Jiang K.R., Wu J.L., Gao W.T., Li Q., Du Q., Miao Y. Comprehensive analysis of the percentage of surface receptors and cytotoxic granules positive natural killer cells in patient with pancreatic cancer, gastric 52 ЛабОратОрныЕ И ЭКСПЕрИМЕнтаЛьныЕ ИССЛЕДОванИя SIBERIAN JOURNAL OF ONCOLOGY. 2017; 16(1): 45–52 cancer, and colorectal cancer. J Transl Med. 2013 Oct 20; 11: 262. doi: 10.1186/1479-5876-11-262.Kim J.C., Choi J., Lee S.J., Lee Y.A., Jeon Y.M., Kang Y.W., Lee J.K. Evaluation of cytolytic activity and phenotypic changes of circulating blood immune cells in patients with colorectal cancer by a simple preparation of peripheral blood mononuclear cells. J Korean Surg Soc. 2013 Nov; 85 (5): 230–5. doi: 10.4174/jkss.2013.85.5.230.Kim J.C., Choi J., Lee S.J., Lee Y.A., Jeon Y.M., Kang Y.W., Lee J.K. Evaluation of cytolytic activity and phenotypic changes of circulating blood immune cells in patients with colorectal cancer by a simple preparation of peripheral blood mononuclear cells. J Korean Surg Soc. 2013 Nov; 85 (5): 230–5. doi: 10.4174/jkss.2013.85.5.230.Rocca Y.S., Roberti M.P., Arriaga J.M., Amat M., Bruno L., Pampena M.B., Huertas E., Loria F.S., Pairola A., Bianchini M., Mordoh J., Levy E.M. Altered phenotype in peripheral blood and tumor-associated NK cells from colorectal cancer patients. Innate Immun. 2013 Feb; 19 (1): 76–85. doi: 10.1177/1753425912453187.Rocca Y.S., Roberti M.P., Arriaga J.M., Amat M., Bruno L., Pampena M.B., Huertas E., Loria F.S., Pairola A., Bianchini M., Mordoh J., Levy E.M. Altered phenotype in peripheral blood and tumor-associated NK cells from colorectal cancer patients. Innate Immun. 2013 Feb; 19 (1): 76–85. doi: 10.1177/1753425912453187.Абакушина Е.В., Кузьмина Е.Г., Коваленко Е.И. Основные свойства и функции NK-клеток человека. Иммунология. 2012; 33 (4): 220–4.Abacushina Е.V., Kuzmina Е.G., Kovalenko Е.I. Basic properties and functions of the human NK-cells. Immunology. 2012; 33 (4): 220–4. [in Russian]Cornfield D.B., Gheith S.M. Flow cytometric quantitation of natural killer cells and T lymphocytes expressing T-cell receptors alpha/beta and gamma/delta is not helpful in distinguishing benign from malignant body cavity effusions. Cytometry B Clin Cytom. 2009 May; 76 (3): 213–7. doi: 10.1002/cyto.b.20455.Cornfield D.B., Gheith S.M. Flow cytometric quantitation of natural killer cells and T lymphocytes expressing T-cell receptors alpha/beta and gamma/delta is not helpful in distinguishing benign from malignant body cavity effusions. Cytometry B Clin Cytom. 2009 May; 76 (3): 213–7. doi: 10.1002/cyto.b.20455.Bamias A., Koutsoukou V., Terpos E., Tsiatas M.L., Liakos C., Tsitsilonis O., Rodolakis A., Voulgaris Z., Vlahos G., Papageorgiou T., Papatheodoridis G., Archimandritis A., Antsaklis A., Dimopoulos M.A. Correlation of NK T-like CD3+CD56+ cells and CD4+CD25+(hi) regulatory T cells with VEGF and TNFalpha in ascites from advanced ovarian cancer: Association with platinum resistance and prognosis in patients receiving first-line, platinum-based chemotherapy. Gynecol Oncol. 2008; 108 (2): 421–7. doi: 10.1016/j.ygyno.2007.10.018.Bamias A., Koutsoukou V., Terpos E., Tsiatas M.L., Liakos C., Tsitsilonis O., Rodolakis A., Voulgaris Z., Vlahos G., Papageorgiou T., Papatheodoridis G., Archimandritis A., Antsaklis A., Dimopoulos M.A. Correlation of NK T-like CD3+CD56+ cells and CD4+CD25+(hi) regulatory T cells with VEGF and TNFalpha in ascites from advanced ovarian cancer: Association with platinum resistance and prognosis in patients receiving first-line, platinum-based chemotherapy. Gynecol Oncol. 2008; 108 (2): 421–7. doi: 10.1016/j.ygyno.2007.10.018.Fossati M., Buzzonetti A., Monego G., Catzola V., Scambia G., Fattorossi A., Battaglia A. Immunological changesin the ascites of cancer patients after intraperitoneal administration of the bispecific antibody catumaxomab (anti-EpCAM×anti-CD3). Gynecol Oncol. 2015 Aug; 138 (2): 343–51. doi: 10.1016/j.ygyno.2015.06.003.Fossati M., Buzzonetti A., Monego G., Catzola V., Scambia G., Fattorossi A., Battaglia A. Immunological changesin the ascites of cancer patients after intraperitoneal administration of the bispecific antibody catumaxomab (anti-EpCAM×anti-CD3). Gynecol Oncol. 2015 Aug; 138 (2): 343–51. doi: 10.1016/j.ygyno.2015.06.003.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.