ИНДУКЦИЯ АПОПТОЗА КЛЕТОК МЕЛАНОМЫ В16 ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ПРЕПАРАТА ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ АЛЬФА В СОСТАВЕ ВИРУСОПОДОБНЫХ ЧАСТИЦ IN VITRO
https://doi.org/10.21294/1814-4861-2020-19-4-99-104
Аннотация
Цель исследования – оценка противоопухолевой активности препарата, содержащего фактор некроза опухолей альфа (ФНО-альфа) и двуспиральную рибонуклеиновую кислоту (дсРНК) в составе молекулярной конструкции («вирусоподобной частицы») (ВПЧ-ФНО-альфа), на клетках меланомы B16-F10.
Материал и методы. Анализ антипролиферативного действия ВПЧ-ФНО-альфа и его компонентов ФНО-альфа и дсРНК проводили с помощью МТТ-теста, апоптоз клеток меланомы оценивали методом проточной цитофлуориметрии с ФИТЦ-аннексином V.
Результаты. Показано, что токсическое воздействие препарата, содержащего ФНО-альфа и дсРНК в составе вирусоподобных частиц, на клетки меланомы значительно превышает суммарный токсический эффект ФНО-альфа и дсРНК в отдельности (ЛД50 составляет, соответственно, для комплексного препарата 0,05 мкг/мл, ФНО-альфа – 9,5 мкг/мл, дсРНК >20 мкг/мл).
Заключение. Препарат, содержащий ФНО-альфа и дсРНК в молекулярной конструкции, может быть многообещающим терапевтическим средством для лечения злокачественных новообразований, включая меланому.
Материал и методы. Анализ антипролиферативного действия ВПЧ-ФНО-альфа и его компонентов ФНО-альфа и дсРНК проводили с помощью МТТ-теста, апоптоз клеток меланомы оценивали методом проточной цитофлуориметрии с ФИТЦ-аннексином V.
Результаты. Показано, что токсическое воздействие препарата, содержащего ФНО-альфа и дсРНК в составе вирусоподобных частиц, на клетки меланомы значительно превышает суммарный токсический эффект ФНО-альфа и дсРНК в отдельности (ЛД50 составляет, соответственно, для комплексного препарата 0,05 мкг/мл, ФНО-альфа – 9,5 мкг/мл, дсРНК >20 мкг/мл).
Заключение. Препарат, содержащий ФНО-альфа и дсРНК в молекулярной конструкции, может быть многообещающим терапевтическим средством для лечения злокачественных новообразований, включая меланому.
Об авторах
Е. А. Вязовая
Институт медицинской биотехнологии ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Россия
Россия
Вязовая Елена Алексеевна, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник отдела биологических исследований
SPIN-код: 3768-1883.
633010, г. Бердск, ул. Химзаводская, 9
Л. Р. Лебедев
Институт медицинской биотехнологии ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Россия
Россия
Лебедев Леонид Рудольфович, доктор медицинских наук, заведующий лабораторией нуклеиновых кислот и рекомбинантных белков
SPIN-код: 4637-3440.
633010, г. Бердск, ул. Химзаводская, 9
Е. Д. Даниленко
Институт медицинской биотехнологии ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Россия
Россия
Даниленко Елена Дмитриевна, кандидат биологических наук, директор
SPIN-код: 1388-4127. Researcher ID (WOS): A-7083-2014.
633010, г. Бердск, ул. Химзаводская, 9
Список литературы
1. Bernardo A.R., Cosgaya J.M., Aranda A., Jiménez-Lara A.M. Synergy between RA and TLR3 promotes type I IFN-dependent apoptosis through upregulation of TRAIL pathway in breast cancer cells. Cell Death Dis. 2013 Jan 31; 4: e479. doi: 10.1038/cddis.2013.5.
2. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины. СПб., 2008. 552 с.
3. Lienard D., Ewalenko P., Delmotte J.J., Renard N., Lejeune F.J. High-dose recombinant tumor necrosis factor alpha in combination with interferon gamma and melphalan in isolation perfusion of the limbs for melanoma and sarcoma. J Clin Oncol. 1992 Jan; 10(1): 52–60. doi: 10.1200/JCO.1992.10.1.52.
4. Чубенко В.А. Иммунотерапия на основе цитокинов (ИЛ-1, ИЛ-2, ТНФ, КСФ, Интерфероны). Практическая онкология. 2016; 17(2): 99–109. doi: 10.31917/1702099.
5. Xu G., Gu H., Hu B., Tong F., Liu D., Yu X., Zheng Y., Gu J. PEGb-(PELG-g-PLL) nanoparticles as TNF-α nanocarriers: potential cerebral ischemia/reperfusion injury therapeutic applications. Int J Nanomedicine. 2017 Mar 23; 12: 2243–2254. doi: 10.2147/IJN.S130842.
6. Масычева В.И., Лебедев Л.Р., Даниленко Е.Д., Сысоева Г.М., Гамалей С.Г.; ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора. Противоопухолевое средство на основе наночастицы, несущей рекомбинантный фактор некроза опухолей альфа. Патент № 2386447 РФ, МКП А61К 38/19. № 2008140246/15; Заявл. 13.10.08; Опубл. 20.04.10, Бюл. № 11.
7. Chawla-Sarkar M., Leaman D.W., Borden E.C. Preferential induction of apoptosis by interferon (IFN)-beta compared with IFN-alpha2: correlation with TRAIL/Apo2L induction in melanoma cell lines. Clin Cancer Res. 2001 Jun; 7(6): 1821–31.
8. Dai X., Zhang J., Arfuso F., Chinnathambi A., Zayed M.E., Alharbi S.A., Kumar A.P., Ahn K.S., Sethi G. Targeting TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) receptor by natural products as a potential therapeutic approach for cancer therapy. Exp Biol Med (Maywood). 2015 Jun; 240(6): 760–73. doi: 10.1177/1535370215579167.
9. Gantier M.P., Williams B.R. The response of mammalian cells to double-stranded RNA. Cytokine Growth Factor Rev. 2007 Oct-Dec; 18(5–6): 363–71. doi: 10.1016/j.cytogfr.2007.06.016.
10. Salaun B., Lebecque S., Matikainen S., Rimoldi D., Romero P. Toll-like receptor 3 expressed by melanoma cells as a target for therapy? Clin Cancer Res. 2007 Aug 1; 13(15 Pt 1): 456574. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-07-0274.
11. Гамалей С.Г., Даниленко Е.Д., Батенева А.В., Лебедев Л.Р., Масычева В.И. Фармакокинетика молекулярной конструкции для депонирования и транспортировки к клеткам-мишеням биологически активных веществ. Сибирский медицинский журнал. 2008; (3): 92–5.
12. Лебедев Л.Р., Аликин Ю.С., Рослякова Е.Ю., Подгорный В.Ф., Дубинкина О.С., Азаев М.Ш. Выделение и очистка двуспиральной рибонуклеиновой кислоты из киллерного штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Биофармацевтический журнал. 2014; 6(6): 32–8.
13. Пустошилова Н.М., Килева Е.В., Денисова Л.Я., Шингарева Н.В., Коробко В.Г., Денисов Л.А., Масычева В.И., Сандахчиев Л.С., Калинин Ю.Т.; ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора. Способ получения рекомбинантного фактора некроза опухолей человека. Патент № 2144958 РФ, МКП C12N 15/28. № 97106895; Заявл. 23.04.97; Опубл. 27.01.00, Бюл. № 3.
14. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. J Immunol Methods. 1983 Dec 16; 65(1–2): 55–63. doi: 10.1016/0022-1759(83)90303-4.
15. Zhao Y., Liu H., Xu L., Guo B., Kalvakolanu D.V., Liu X., Hu J., Zhang D., Sun Y., Zhang L., Xu D., Zhao X. Synergistic Suppression of Melanoma Growth by a Combination of Natural dsRNA and Panaxadiolsaponins. J Interferon Cytokine Res. 2018 Sep; 38(9): 378–387. doi: 10.1089/jir.2018.0037.
16. Chawla-Sarkar M., Lindner D.J., Liu Y.F., Williams B.R., Sen G.C., Silverman R.H., Borden E.C. Apoptosis and interferons: role of interferonstimulated genes as mediators of apoptosis. Apoptosis. 2003 Jun; 8(3): 237–49. doi: 10.1023/a:1023668705040.
17. Coati I., Miotto S., Zanetti I., Alaibac M. Toll-like receptors and cutaneous melanoma. Oncol Lett. 2016; 12(5): 3655–3661. doi: 10.3892/ol.2016.5166.
18. Peine K.J., Bachelder E.M., Vangundy Z., Papenfuss T., Brackman D.J., Gallovic M.D., Schully K., Pesce J., Keane-Myers A., Ainslie K.M. Efficient delivery of the toll-like receptor agonists polyinosinic:polycytidylic acid and CpG to macrophages by acetalated dextran microparticles. Mol Pharm. 2013 Aug 5; 10(8): 2849–57. doi: 10.1021/mp300643d.
Рецензия
При поддержке: Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ в рамках Федеральной целевой программы «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу», Государственный контракт № 14.N08.12.0089 от 29.08.2016 г.
Для цитирования:
Вязовая Е.А., Лебедев Л.Р., Даниленко Е.Д. ИНДУКЦИЯ АПОПТОЗА КЛЕТОК МЕЛАНОМЫ В16 ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ПРЕПАРАТА ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ АЛЬФА В СОСТАВЕ ВИРУСОПОДОБНЫХ ЧАСТИЦ IN VITRO. Сибирский онкологический журнал. 2020;19(4):99-104. https://doi.org/10.21294/1814-4861-2020-19-4-99-104
For citation:
Vyazovaya E.A., Lebedev L.R., Danilenko E.D. INDUCTION OF APOPTOSIS IN B16 MELANOMA CELLS UNDER THE ACTION OF DRUG CONTAINING TUMOR NECROSIS FACTOR ALPHA AS A PART OF VIRUS-LIKE PARTICLES IN VITRO. Siberian journal of oncology. 2020;19(4):99-104. (In Russ.) https://doi.org/10.21294/1814-4861-2020-19-4-99-104
Просмотров: 682
.png)
Послать статью по эл. почте 
