ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ТР53 У ПАЦИЕНТОВ С РАКОМ ЖЕЛУДКА В ПОПУЛЯЦИОННОМ ПРОСПЕКТИВНОМ И КЛИНИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИЯХ

Актуальность. Функционально значимый полиморфизм Arg72Pro 4 экзона гена онкосупрессора ТР53 может вносить вклад в развитие рака желудка (РЖ).

Цель исследования – изучить ассоциации генотипов и аллелей полиморфизма Arg72Pro 4  экзона гена ТР53 с РЖ и биомаркерами атрофии слизистой у пациентов с РЖ в популяционном проспективном и клиническом исследованиях «случай-контроль» в сибирской популяции.

Материал и методы. В рамках эпидемиологического исследования были сопоставлены  база международного многоцентрового проекта HAPIEE, сформированная в 2003–05 гг. на  популяционной выборке жителей Новосибирска (образцы ДНК и сыворотки крови хранились при –70 ºС), и данные популяционного регистра РЖ (2012 г). Для каждого случая РЖ в  соотношении 1:2 был подобран соответствующий по возрасту и полу контроль из базы  HAPIEE. 156 образцов сыворотки крови (РЖ – 52, контроль – 104) и 146 образцов ДНК (РЖ – 50, контроль – 96) оказались доступны для проспективного анализа. В клинической группе  проанализирована серия случаев РЖ (45 мужчин и 35 женщин, средний возраст – 61,0 ±  13,4 годы) из 2 специализированных лечебных учреждений. В качестве «контроля» из базы  HAPIEE были использованы образцы ДНК 87 человек, подобранных к «случаям» по полу и  возрасту. Образцы ДНК из венозной крови генотипировали по стандартным методикам.  Образцы сыворотки тестировали с помощью диагностикумов для иммуноферментного анализа с определением уровней пепсиногена I (ПГI), ПГII,  соотношения ПГI/ПГII, гастрина-17 и IgG антител к H. рylori.

Результаты. Частоты генотипов и аллелей гена ТР53 у пациентов с РЖ в обоих исследованиях не различались, как и между группами «случай» и «контроль».  Снижение частоты аллеля Pro у женщин с РЖ по сравнению с контролем дает основания  рассматривать Pro аллель в качестве защитного в отношении формирования рака желудка.  Для мужчин такой закономерности не отмечено. Не обнаружено связи генотипов ТР53 с  риском развития диффузного или интестинального типов рака желудка, а также ассоциаций  с возрастом и полом пациентов. Высокая частота генотипов с аллелем Pro у больных РЖ III– IV стадии свидетельствует о возможном влиянии генетического статуса ТР53 по Arg/Pro полиморфизму на опухолевую прогрессию, в частности, вклад минорного аллеля Pro в  неблагоприятный прогноз. В проспективном исследовании получены данные о высокой  рисковой значимости снижения уровня пепсиногена для оценки предрасположенности к раку желудка.

Выводы. В двух исследованиях «случай-контроль» (популяционном и клиническом) в  регионе Западной Сибири не найдено связи полиморфизма Arg72Pro гена ТР53 с риском  развития рака желудка. Однако генотип ТР53 с редким аллелем Pro ассоциирован с  атрофическим гастритом, который является предраковым состоянием, а также c клиническим течением РЖ.

1. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2012 году. М., 2014. 226.

2. Писарева Л.Ф., Одинцова И.Н., Ананина О.А., Афанасьев С.Г., Волков М.Ю., Давыдов И.М. Рак желудка в Томской области: эпидемиологические аспекты. Сибирский онкологический журнал. 2013; 3: 40–43.

3. Correa P., Haenszel W., Cuello C., Zavala D., Fontham E., Zarama G., Tannenbaum S., Collazos T., Ruiz B. Gastric precancerous process in a high risk population: cohort follow-up. Cancer Res. 1990; 50: 4737–40.

4. Agréus L., Kuipers E.J., Kupcinskas L., Malfertheiner P., Di Mario F., Leja M., Mahachai V., Yaron N., van Oijen M., Perez Perez G., Rugge M., Ronkainen J., Salaspuro M., Sipponen P., Sugano K., Sung J. Rationale in diagnosis and screening of atrophic gastritis with stomach- specific plasma biomarkers. Scand J Gastroenterol. 2012 Feb; 47(2): 13647. doi: 10.3109/00365521.2011.645501.

5. Bornschein J., Selgrad M., Wex T., Kuester D., Malfertheiner P. Serological assessment of gastric mucosal atrophy in gastric cancer. BMC Gastroenterol. 2012 Jan 31; 12: 10. doi: 10.1186/1471-230X-12-10.

6. Miki K. Gastric cancer screening using the serum pepsinogen test method. Gastric Cancer. 2006; 9 (4): 245–53.

7. Schlemper R.J., Riddell R.H., Kato Y., Borchard F., Cooper H.S., Dawsey S.M., Dixon M.F., Fenoglio-Preiser C.M., Fléjou J.F., Geboes K., Hattori T., Hirota T., Itabashi M., Iwafuchi M., Iwashita A., Kim Y.I., Kirchner T., Klimpfinger M., Koike M., Lauwers G.Y., Lewin K.J., Oberhuber G., Offner F., Price A.B., Rubio C.A., Shimizu M., Shimoda T., Sipponen P., Solcia E., Stolte M., Watanabe H., Yamabe H. The Vienna classifcation of gastrointestinal epithelial neoplasia. Gut. 2000; 47 (2): 251–5.

8. Levine A.J., Hu W., Feng Z. The h53 pathway: what questions remain to be explored? Cell Death Differ. 2006; 13: 1027–36.

9. Soussi T., Asselain B., Hamroun D., Kato S., Ishioka C., Claustres M., Béroud C. Meta- analysis of the p53 Mutation Database for Mutant p53 Biological Activity Reveals a Methodologic Bias in Mutation Detection. Clinical Cancer Research. 2006; 12: 62–69. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-05-0413.

10. Petitjean A., Mathe E., Kato S., Ishioka C., Tavtigian S.V., Hainaut P., Olivier M. Impact of mutant p53 functional properties on TP53 mutation patterns and tumor phenotype: lessons from recent developments in the IARC TP53 database. Hum Mutat. 2007; 28: 622–9. doi: 10.1002/humu.20495.

11. Алмазов В.П., Кочетков Д.В., Чумаков П.М. р53 – инструмент для терапии злокачественных заболеваний человека. Молекулярная биология. 2007; 41 (6): 947–964.

12. Bond G.L., Levine A.J. A single nucleotide polymorphism in the p53 pathway interacts with gender, environmental stresses and tumor genetics to influence cancer in humans. Oncogene. 2007 Feb 26; 26 (9): 1317–23. doi: 10.1038/sj.onc.1210199.

13. Hay S., Kannourakis G. A time to kill: viral manipulation of the cell death program. J Gen Virol. 2002; 83: 154–164. doi: 10.1099/0022-1317-83-7-1547.

14. Lima V.P., de Lima M.A., André A.R., Ferreira M.V., Barros M.A., Rabenhorst S.H. H pylori (CagA) and Epstein-Barr virus infection in gastric carcinomas: correlation with p53 mutation and c-Myc, Bcl-2 and Bax expression. World J Gastroenterol. 2008 Feb 14; 14 (6): 884–91.

15. Kamp W.M., Wang P.Y., Hwang P.M. TP53 mutation, mitochondria and cancer. Curr Opin Genet Dev. 2016 Jun; 38: 16–22. doi: 10.1016/j.gde.2016.02.007.

16. Murakami K., Fujioka T., Okimoto T., Mitsuishi Y., Oda T., Nishizono A., Nasu M. Analysis of p53 gene mutations in Helicobacter pylori-associated gastritis mucosa in endoscopic biopsy specimens. Scand J Gastroenterol. 1999 May; 34 (5): 474–7.

17. Wang J., Chi D.S., Kalin G.B., Sosinski C., Miller L.E., Burja I., Thomas E. Helicobacter pylori infection and oncogene expressions in gastric carcinoma and its precursor lesions. Dig Dis Sci. 2002; 47: 107–13.

18. Hongyo T., Buzard G.S., Palli D., Weghorst C.M., Amorosi A., Galli M., Caporaso N.E., Fraumeni J.F. Jr., Rice J.M. Mutations of the K-ras and p53 genes in gastric adenocarcinomas from a high-incidence region around Florence, Italy. Cancer Res. 1995; 55: 2665–72.

19. Kountouras J., Zavos C., Chatzopoulos D., Katsinelos P. New Aspects of Helicobacter pylori Infection Involvement in Gastric Oncogenesis. J Surg Res. 2008; 146: 149–158. doi: 10.1016/j.jss.2007.06.011.

20. Liu X.P., Tsushimi K., Tsushimi M., Oga A., Kawauchi S., Furuya T., Sasaki K. Expression of p53 protein as a prognostic indicator of reduced survival time in diffuse-type gastric carcinoma. Pathol Int. 2001; 51: 440–444.

21. Manniatis T., Fritsch E.F., Sambrook J. Molecular cloning: A laboratory manual. Cold spring harbor, New York. 1982.

22. Воропаева Е.Н., Березина О.В., Овчинников В.С., Воевода М.И., Поспелова Т.И. Предиктивное значение тестирования полиморфного локуса ARG72PRO 4 экзона антионкогена ТР53 у пациентов с неходжкинскими лимфомами. Сибирский научный медицинский журнал. 2013; 33 (1): 28–33.

23. Gleeson C.M., Sloan J.M., McManus D.T., Maxwell P., Arthur K., McGuigan J.A., Ritchie A.J., Russell S.E. Comparison of p53 and DNA content abnormalities in adenocarcinoma of the oesophagus and gastric cardia. Br J Cancer. 1998; 77 (2): 277–286.

24. Tolbert D., Fenoglio-Preiser C., Noffsinger A., De Voe G., Mac-Donald J., Benedetti J., Stemmermann G.N. The relation of p53 gene mutations to gastric cancer subsite and phenotype. Cancer Causes Control. 1999 Jun; 10 (3): 227–31.

25. Fearon E.R., Vogelstein B. A genetic model for colorectal tumorigenesis. Cell. 1990; 61 (5): 759–767.

26. Busuttil R.A., Zapparoli G.V., Haupt S., Fennell C., Wong S.Q., Pang J.M., Takeno E.A., Mitchell C., Di Costanzo N., Fox S., Haupt Y., Dobrovic A., Boussioutas A. Role of p53 in the progression of gastric cancer. Oncotarget. 2014 Dec 15; 5 (23): 12016–26.

27. Wade M., Li Y.C., Wahl G.M. MDM2, MDMX and p53 in oncogenesis and cancer therapy. Nat Rev Cancer. 2013 Feb; 13 (2): 83–96. doi: 10.1038/nrc3430.

28. Xiang B., Mi Y., Li T.F., Liu P.F. Updated Meta-analysis of the TP53 Arg72Pro Polymorphism and Gastric Cancer Risk. Asian Pac J Cancer Prev. 2012; 13 (5): 1787–91.

29. De Feo E., Persiani R., La Greca A., Amore R., Arzani D., Rausei S., D’Ugo D., Magistrelli P., van Duijn C.M., Ricciardi G., Boccia S. A casecontrol study on the effect of p53 and p73 gene polymorphisms on gastric cancer risk and progression. Mutat Res. 2009 Apr 30; 675 (1–2): 60–5. doi: 10.1016/j.mrgentox.2009.02.009.

30. Wu M.T., Chen M.C., Wu D.C. Influences of lifestyle habits and p53 codon 72 and p21 codon 31 polymorphisms on gastric cancer risk in Taiwan. Cancer Lett. 2004 Mar 8; 205 (1): 61–8. doi: 10.1016/j.canlet.2003.11.026.

31. Sul J., Yu G.P., Lu Q.Y., Lu M.L., Setiawan V.W., Wang M.R., Guo C.H., Yu S.Z., Mu L., Cai L., Kurtz R.C., Zhang Z.F. P53 Codon 72 polymorphisms: a case-control study of gastric cancer and potential interactions. Cancer Lett. 2006 Jul 18; 238 (2): 210–23. doi: 10.1016/j.canlet.2005.07.004.

32. Белявская В.А., Вардосанидзе В.К., Смирнова О.Ю., Каракин Е.И., Савкин И.В., Гервас П.А., Воевода М.И. Генетический статус р53 при раке желудка: соматические мутации и полиморфизм 72 кодона. БЭБиМ. 2006; 141 (2): 205–209.

33. Белявская В.А., Сметанникова Н.А., Сметанникова М.А. Поиск генов «прочности» и «бренности»: роль полиморфизма некоторых ключевых генов иммунологического гомеостаза в развитии патологий, сокращающих продолжительность жизни. Молекулярная медицина. 2005; 3: 55–60.

34. Иванощук Д.Е., Михайлова С.В., Куликов И.В., Максимов В.Н., Воевода М.И., Ромащенко А.Г. Полиморфизм генов ccr5, ccr2, apoe, р53, itgb3 и hfe у долгожителей Западной Сибири. Успехи геронтологии. 2012; 25 (3): 394–397.

35. Pérez-Pérez G.I., Bosques-Padilla F.J., Crosatti M.L., Tijerina-Menchaca R., Garza- González E. Role of p53 codon 72 polymorphism in the risk of development of distal gastric cancer. Scand J Gastroenterol. 2005 Jan; 40 (1): 56–60.

36. Sugano K., Tack J., Kuipers E.J., Graham D.Y., El-Omar E.M., Miura S., Malfertheiner P. Kyoto global consensus report on Helicobacter pylori gastritis. Gut. 2015; 64 (9): 1353–1367. doi: 10.1136/gutjnl-2015-309252.

37. Begnami M.D., Fregnani J.H., Nonogaki S., Soares F.A. Evaluation of cell cycle protein expression in gastric cancer: cyclin B1 expression and its prognostic implication. Hum Pathol. 2010 Aug; 41 (8): 1120–7. doi: 10.1016/j.humpath.2010.01.007.

38. Gonçalves A.R., Carneiro A.J., Martins I., de Faria P.A., Ferreira M.A., de Mello E.L., Fogaça H.S., Elia C.C., de Souza H.S. Prognostic significance of p53 protein expression in early gastric cancer. Pathol Oncol Res. 2011 Jun; 17 (2): 349–55. doi: 10.1007/s12253-010-9333-z.

39. Lazăr D., Tăban S., Sporea I., Dema A., Cornianu M., Lazăr E., Goldiş A., Raţiu I., Vernic C. The immunohistochemical expression of the p53-protein in gastric carcinomas. Correlation with clinicopathological factors and survival of patients. Rom J Morphol Embryol. 2010; 51: 249–57.