ХАРАКТЕРИСТИКИ ИММУННОГО МИКРООКРУЖЕНИЯ НОРМАЛЬНОЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПЕРИТУМОРАЛЬНОЙ ОБЛАСТИ – ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЙ НЕЗАВИСИМЫЙ ПРОГНОСТИЧЕСКИЙ ФАКТОР ПРИ РАКЕ ЖЕЛУДКА

Цель исследования – оценка прогностического значения иммунного микроокружения рака желудка и морфологически нормальной слизистой оболочки перитуморальной области с применением системы автоматического морфометрического анализа на примере cd8+ клеток.

Материал и методы. Использованы образцы операционного материала от 130 пациентов с верифицированным диагнозом рака желудка. После проведения иммуногистохимического окрашивания с антителами к cd8 была проведена морфологическая оценка по оригинальной методике: подсчет средней площади cd8+ клеток в трех полях зрения при ×20, измеренной с помощью автоматической системы морфометрического анализа las X, в центральной части опухоли и участках морфологически нормальной слизистой оболочки перитуморальной области, непосредственно прилежащей к опухолевой ткани. Результаты сопоставлены
с основными клинико-морфологическими характеристиками опухолевого процесса и с общей пятилетней выживаемостью пациентов.

Результаты и обсуждение. Высокая плотность инфильтрации cd8+ клетками в участках нормальной слизистой оболочки перитуморальной области наблюдалась в группах t4a и t4b по глубине инвазии (n=96, p=0,0089); была ассоциирована с наличием эмболов в лимфатических сосудах (n=96, p=0,0102) и с более продвинутой стадией рака желудка (n=96, p=0,0107). Исследованные случаи были разделены на две группы: до 3300 кв.мкм (лучшая выживаемость пациентов – n=79, p=0,01) и от 3300 кв.мкм и более по средней площади cd8+ клеток в участках нормальной слизистой оболочки перитуморальной области. При проведении многофакторного анализа выживаемости с использованием регрессионной модели Кокса установлено, что средняя площадь cd8+ клеток в нормальной слизистой оболочке перитуморальной области является значимым отрицательным прогностическим фактором (RR=1,537; ci: 1,102–3,105; p<0,01), сопоставимым по степени ковариации со стадией опухолевого процесса. Аналогичный показатель, измеренный в центральной части опухоли, не был значимо ассоциирован с выживаемостью пациентов (RR=0,803; ci:0,574–1,122; p>0,05).

Заключение. Впервые продемонстрирована возможность использования системы автоматического анализа для оценки иммунного микроокружения при раке желудка и установлено, что высокий уровень инфильтрации cd8+ лимфоцитами морфологически нормальной слизистой оболочки перитуморальной области является независимым неблагоприятным прогностическим фактором, в связи с чем рекомендуем обязательный
забор биопсийного материала из слизистой оболочки перитуморальной области на предоперационном этапе для морфометрической оценки инфильтрации cd8+ лимфоцитами.

1. Bray F., Ferlay J., Soerjomataram I., Siegel R.L., Torre L.A., Jemal A. Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin. 2018 Nov; 68(6): 394–424. doi: 10.3322/caac.21492.

2. Cancer Genome Atlas Research Network. Comprehensive molecular characterization of gastric adenocarcinoma. Nature. 2014 Sep 11; 513(7517): 202–9. doi: 10.1038/nature13480.

3. Ajani J.A., Amin M.B., Edge S., Greene F., Byrd D.R., Brookland R.K. AJCC Cancer Staging Manual. 8th ed. Springer, American Joint Committee on Cancer; 2017. 1032 p.

4. Jiang W., Liu K., Guo Q., Cheng J., Shen L., Cao Y., Wu J., Shi J., Cao H., Liu B., Tao K., Wang G., Cai K. Tumor-infiltrating immune cells and prognosis in gastric cancer: a systematic review and meta-analysis. Oncotarget. 2017 May 3; 8(37): 62312–62329. doi: 10.18632/oncotarget.17602.

5. Zhang D., He W., Wu C., Tan Y., He Y., Xu B., Chen L., Li Q., Jiang J. Scoring System for Tumor-Infiltrating Lymphocytes and Its Prognostic Value for Gastric Cancer. Front Immunol. 2019; 10: 71. doi: 10.3389/fimmu.2019.00071.

6. Kumar V., Abbas A.K., Aster J.C. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease. Philadelphia: Elsevier Saunders. 2015.

7. Lu P., Weaver V.M., Werb Z. The extracellular matrix: a dynamic niche in cancer progression. J Cell Biol. 2012; 196(4): 395–406. doi: 10.1083/jcb.201102147.

8. Fridman W.H., Pagès F., Sautès-Fridman C., Galon J. The immune contexture in human tumours: impact on clinical outcome. Nat Rev Cancer. 2012 Mar 15; 12(4): 298–306. doi: 10.1038/nrc3245. PMID: 22419253.

9. Ma H.Y., Liu X.Z., Liang C.M. Inflammatory microenvironment contributes to epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer. World J Gastroenterol. 2016 Aug 7; 22(29): 6619–28. doi: 10.3748/wjg.v22.i29.6619.

10. Sawayama H., Ishimoto T., Baba H. Microenvironment in the pathogenesis of gastric cancer metastasis. J Cancer Metastasis Treat. 2018; 4(10). doi: 10.20517/2394-4722.2017.79.

11. Liu K., Yang K., Wu B., Chen H., Chen X., Chen X., Jiang L., Ye F., He D., Lu Z., Xue L., Zhang W., Li Q., Zhou Z., Mo X., Hu J.Tumor-Infiltrating Immune Cells Are Associated With Prognosis of Gastric Cancer. Medicine (Baltimore). 2015 Sep; 94(39): e1631. doi: 10.1097/MD.0000000000001631.

12. Hendry S., Salgado R., Gevaert T., Russell P.A., John T., Thapa B., Christie M., van de Vijver K., Estrada M.V., Gonzalez-Ericsson P.I., Sanders M., Solomon B., Solinas C., Van den Eynden G.G.G.M., Allory Y., Preusser M., Hainfellner J., Pruneri G., Vingiani A., Demaria S., Symmans F., Nuciforo P., Comerma L., Thompson E.A., Lakhani S., Kim S.-R., Schnitt S., Colpaert C., Sotiriou C., Scherer S.J., Ignatiadis M., Badve S., Pierce R.H., Viale G., Sirtaine N., Penault-Llorca F., Sugie T., Fineberg S., Paik S., Srinivasan A., Richardson A., Wang Y., Chmielik E., Brock J., Johnson D.B., Balko J., Wienert S., Bossuyt V., Michiels S., Ternes N., Burchardi N., Luen S.J., Savas P., Klauschen F., Watson P.H., Nelson B.H., Criscitiello C., O’Toole S., Larsimont D., de Wind R., Curigliano G., Andre F., Lacroix-Triki M., van de Vijver M., Rojo F., Floris G., Bedri S., Sparano J., Rimm D., Nielsen T., Kos Z., Hewitt S., Singh B., Farshid G., Loibl S., Allison K.H., Tung N., Adams S., Willard-Gallo K., Horlings H.M., Gandhi L., Moreira A., Hirsch F., Dieci M.V., Urbanowicz M., Brcic I., Korski K., Gaire F., Koeppen H., Lo A., Giltnane J., Rebelatto M.C., Steele K.E., Zha J., Emancipator K., Juco J.W., Denkert C., Reis-Filho J. Assessing Tumor-infiltrating Lymphocytes in Solid Tumors: A Practical Review for Pathologists and Proposal for a Standardized Method From the International Immunooncology Biomarkers Working Group: Part 1: Assessing the Host Immune Response, TILs in Invas. Adv Anat Pathol. 2017 Sep; 24(5): 235–251. doi: 10.1097/PAP.0000000000000162.

13. Mikhailov I., Danilova N., Malkov P., Oleynikova N. CD4+ and CD8+ lymphocytes in the immune microenvironment of gastric cancer: evaluation in Tumour Tissue (TT) and Adjacent Areas of Unchanged Mucosa (AAUM). Virchows Arch. 2019; 475(Suppl 1): S282. doi: 10.1007/s00428-019-02631-8.

14. Löffek S., Zigrino P., Angel P., Anwald B., Krieg T., Mauch C. High invasive melanoma cells induce matrix metalloproteinase-1 synthesis in fibroblasts by interleukin-1alpha and basic fibroblast growth factormediated mechanisms. J Invest Dermatol. 2005 Mar; 124(3): 638–43. doi: 10.1111/j.0022-202X.2005.23629.x.

15. Wang Y., Wu H., Wu X., Bian Z., Gao Q. Interleukin 17A promotes gastric cancer invasiveness via NF-κB mediated matrix metalloproteinases 2 and 9 expression. PLoS One. 2014; 9(6): e96678. doi: 10.1371/journal.pone.0096678.