МОНИТОРИНГ МУТАЦИЙ В ГЕНЕ EGFR В ЦИРКУЛИРУЮЩЕЙ ДНК ПЛАЗМЫ КРОВИ БОЛЬНЫХ НЕМЕЛКОКЛЕТОЧНЫМ РАКОМ ЛЕГКОГО

Активирующие мутации гена EGFR связаны с чувствительностью немелкоклеточного рака легкого (НМКРЛ) к ингибиторам тирозинкиназ (ИТК). Жидкостная биопсия с использованием циркулирующей внеклеточной опухолевой ДНК (цоДНК) предлагается в случаях, когда опухолевая ткань недоступна, а также для мониторинга статуса гена EGFR. В данном исследовании мы опробовали новый метод на основе количественной ПЦР (кПЦР) для выявления мутаций гена EGFR в цоДНК плазмы. Чувствительность метода составила 1 % мутантного аллеля EGFR L858R, L861Q, S768I и делеций экзона 19 и 5 % мутантного аллеля EGFR G719X или T790M. В плазме крови, взятой до операции, мутации были выявлены в 4 из 7 (57 %) случаев с мутацией гена EGFR в ткани опухоли. При этом в двух случаях мутации в цоДНК полностью соответствовали мутациям, которые были обнаружены в ткани опухоли. В одном случае при наличии мутаций G719X и S768I в ткани опухоли только S768I была выявлена в цоДНК. Еще в одном случае мутация T790M была выявлена в плазме дополнительно к мутации L858R, которая была в ткани опухоли. Мутации гена EGFR не были обнаружены в ДНК плазмы крови 12 здоровых доноров и 13 больных НМКРЛ, имевших ген EGFR дикого типа, что означает 100 % специфичность теста. Жидкостная биопсия выявила мутации EGFR в 8 из 16 случаев НМКРЛ, которые несли мутации гена EGFR и проходили курс терапии с использованием ИТК. В этой группе в 7 случаях мутации в жидкой биопсии соответствовали тем, которые были в опухолевой ткани, а еще в одном случае мутация T790M была выявлена дополнительно к мутации L858R. В 3 случаях увеличение частоты мутантного аллеля было выявлено за 2–12 мес до клинической прогрессии.

жидкостная биопсия, qPCR, EGFR, мутация, рак легких

1. Morgensztern D., Campo M.J., Dahlberg S.E., Doebele R.C., Garon E., Gerber D.E., Goldberg S.B., Hammerman P.S., Heist R.S., Hensing T., Horn L., Ramalingam S.S., Rudin C.M., Salgia R., Sequist L.V., Shaw A.T., Simon G.R., Somaiah N., Spigel D.R., Wrangle J., Johnson D., Herbst R.S., Bunn P., Govindan R. Molecularly targeted therapies in nonsmallcell lung cancer annual update 2014. J Thorac Oncol. 2015 Jan; 10 (1 Suppl 1): S1–63. doi: 10.1097/JTO.0000000000000405.

2. Soria J.C., Ohe Y., Vansteenkiste J., Reungwetwattana T., Chewaskulyong B., Lee K.H., Dechaphunkul A., Imamura F., Nogami N., Kurata T., Okamoto I., Zhou C., Cho B.C., Cheng Y., Cho E.K., Voon P.J., Planchard D., Su W.C., Gray J.E., Lee S.M., Hodge R., Marotti M., Rukazenkov Y., Ramalingam S.S.; FLAURA Investigators. Osimertinib in Untreated EGFRMutated Advanced Non-Small-Cell Lung Cancer. N Engl J Med. 2018 Jan 11; 378 (2): 113–125. doi: 10.1056/NEJMoa1713137.

3. Kerr K.M., Bubendorf L., Edelman M.J., Marchetti A., Mok T., Novello S., O’Byrne K., Stahel R., Peters S., Felip E.; Panel Members; Panel Members. Second ESMO consensus conference on lung cancer: pathology and molecular biomarkers for non-small-cell lung cancer. Ann Oncol. 2014 Sep; 25 (9): 1681–90. doi: 10.1093/annonc/mdu145.

4. Kalemkerian G.P., Narula N., Kennedy E.B., Biermann W.A., Donington J., Leighl N.B., Lew M., Pantelas J., Ramalingam S.S., Reck M., Saqi A., Simoff M., Singh N., Sundaram B. Molecular Testing Guideline for the Selection of Patients With Lung Cancer for Treatment With Targeted Tyrosine Kinase Inhibitors: American Society of Clinical Oncology Endorsement of the College of American Pathologists/International Association for the Study of Lung Cancer/Association for Molecular Pathology Clinical Practice Guideline Update. J Clin Oncol. 2018 Mar 20; 36 (9): 911–919. doi: 10.1200/JCO.2017.76.7293.

5. Rolfo C., Mack P.C., Scagliotti G.V., Baas P., Barlesi F., Bivona T.G., Herbst R.S., Mok T.S., Peled N., Pirker R., Raez L.E., Reck M., Riess J.W., Sequist L.V., Shepherd F.A., Sholl L.M., Tan D.S., Wakelee H.A., Wistuba I.I., Wynes M.W., Carbone D.P., Hirsch F.R., Gandara D.R. IASLC Statement Paper: Liquid Biopsy for Advanced Non-Small Cell Lung Cancer (NSCLC). J Thorac Oncol. 2018 Sep; 13 (9): 1248–1268. doi: 10.1016/j.jtho.2018.05.030.

6. Francis G., Stein S. Circulating Cell-Free Tumour DNA in the Management of Cancer. Int J Mol Sci. 2015 Jun 19; 16(6): 14122–42. doi: 10.3390/ijms160614122.

7. Wu Y.L., Sequist L.V., Hu C.P., Feng J., Lu S., Huang Y., Li W., Hou M., Schuler M., Mok T., Yamamoto N., O’Byrne K., Hirsh V., Gibson N., Massey D., Kim M., Yang J.C. EGFR mutation detection in circulating cellfree DNA of lung adenocarcinoma patients: analysis of LUX-Lung 3 and 6. Br J Cancer. 2017 Jan 17; 116 (2): 175–185. doi: 10.1038/bjc.2016.420.